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5×105cells/T25培养瓶
脂肪间充质干细胞是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。主要恢复组织细胞的修复功能,促进细胞的再生,恢复年轻面容的同时,身体机能也得到充分改善,有效改善亚健康、早衰等疾病,由内而外真正的有效抵抗衰老。
脂肪间充质干细胞能够在体外稳定增殖且衰亡率低,同时它具有取材容易、少量组织即可获取大量干细胞,适宜大规模培养,对机体损伤小等优点,而且其来源广泛,体内储备量大,适宜自体移植,逐渐成为近年来新的研究热点之一。
细胞特性
1)细胞来源于手术取得的正常人脂肪组织。
2)细胞鉴定:CD44免疫荧光染色为阳性,CD45免疫荧光染色为阴性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验脂肪干细胞的应用脂肪组织是人体内含量十分丰富的组织。随着肥胖症患者的增多,人类脂肪开始“富余”,并渐成为累赘。人们一直以为,脂肪仅仅只有储存热量作用,过量储存会导致脂肪肝、血管硬化。殊不知,脂肪还蕴藏有十分稀缺的干细胞资源。Zuk等人将脂肪抽吸术后的脂肪细胞(processed lipoaspirate cell,PLA)收集、消化后进行体外培养研究。经过不同的细胞因子的诱导,PLA能够向骨、软骨、骨骼肌、脂肪、神经等组织转化。PLA经转化后细胞表面的CD标记物与骨髓干细胞的诱导分化标记
短梭状),24小时后第一次换液,以后3天换液一次。培养3-4天时,细胞生长繁殖,细胞数量增加,并可见细胞形成孤立小片(细胞岛),逐渐扩展,细胞透明,颗粒啥,界线清晰。7-10天细胞已基本铺满瓶壁形成致密单层,(80%融合后)可进行传代培养。 3. 细胞传代培养 (1)操作步骤 a. 取一瓶脂肪干细胞在倒置相差显微镜下观察,培养细胞如长成致密的单层,即可进行传代。 b. 将培养瓶带人超净工作台,倒去细胞培养液,吸取2ml-3ml PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后倾去,可重复进行
mL/L FBS+10 g/L青霉素的DMEM悬浮后移入培养瓶中,37℃,50 mL/L CO2培养箱中孵育。(5)48 h后首次换液,弃去悬浮细胞. 随后每3天换液,1周后传代. 将第3代细胞用于流式细胞仪检测. 浓集细胞到109/L后进行流式细胞仪检测。(6)细胞传至第3代时将其以2×107/L的细胞数分别转入各定向培养基中进行培养. 诱导培养2周后,对成脂诱导组进行油红O脂肪颗粒染色。现在脂肪干细胞缺乏特异的表面标志鉴定,各类文献提到脂肪干细胞表达阳性的标志物有:cd13,cd29,cd
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