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文献和实验色。HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。 原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。HEPES使用方法有两种:(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。(2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L
Purification of Plasmid from 50 ml-culture
1. Shake E. coli harboring plasmid at 37 C overnight in 50 ml of TB containing appropriate antibiotics. (when using ampicillin, addition of the antibiotics to 100-200 ug/ml rather than usual 50 ug/ml may improve the yield of plasmids.)
Mag-Bind Blood DNA Maximum Yield Protocol (2ml-6ml)
实验试剂 1. Absolute ethanol (96%-100%) 实验设备 1. Nuclease-free 50 ml centrifuge tube 2. Water bath, incubator or heating block preset at 65°C 3. Magnetic separation device for 50 ml tube
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