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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 库存:
20-60
- 供应商:
上海抚生
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
Cyclin L
- 规格:
0.2ml
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文献和实验个内源性表达的细胞周期基因。为此我们使用LightCycler® 480实时荧光定量PCR仪和RealTime ready细胞周期检测预制多孔板。用特异抗体和流式细胞术测定天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的激活。在这个分析中,我们发现C24ORF17和BARD1基因下调后,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的激活增加了。为了确定编码蛋白在凋亡诱导中的作用,在本研究中我们使用RealTime ready凋亡检测预制多孔板和LightCycler® 480仪器,通过qRT-PCR分析了当通过RNAi而表达
能和 FcγR Ⅲ/Ⅱ结合,封闭非特异性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入 0.5-1μg 纯的抗小鼠 CD16/32 单克隆抗体,室温孵育 10min。 对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化 Ig 或者与目标种属相同来源血清进行阻断,或者用商业化的 Fc 受体阻断剂。 五、细胞表面抗体孵育 根据实验设计,除空白对照外,对应的单染管、全染管加入相应的抗体 5μL,混匀,4℃ 避光孵育 30min。 六、固定破膜 按照说明书稀释固定破膜液。 每管加入
获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解 30 min,细胞裂解液于 4 ℃,最大转速离心 30 min 后取上清; 取少量裂解液以备 Western blot 分析,剩余裂解液加 1 μg 相应的抗体加入到细胞裂解液,4 ℃ 缓慢摇晃孵育过夜; 取 10 μl protein A 琼脂糖珠,用适量裂解缓冲液洗 3 次,每次 3 000 rpm,离心 3 min; 将预处理过的 10 μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中 4 ℃ 缓慢摇晃孵育
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