谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)

特别提示：包括谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)
英文名称：Glutathione Agarose Resin
产品规格：10ml

Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载＞20mg GST融合蛋白。

此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。

基质（Matrix）：4%琼脂糖微球
配体（Ligand）：通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞20mg GST protein/ml 基质（40kDa）
最大压力（PressureMax）：0.1 MPa, 1bar
pH稳定范围：3-12
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年

需准备试剂
所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。
结合/洗杂缓冲液：PBS，pH7.4(140mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4)
洗脱缓冲液：50mM Tris-HCl, 10mM 还原型谷胱甘肽，pH 8.0
【注】：结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。

使用方法
【注】样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。

1样品纯化
1）装柱：将Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，注意避免产生气泡。
2）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
3）上样：Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。
4）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
5）洗脱：使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。
6）清洗与保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。

2 SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。

3 填料清洗

GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
1）去除一些沉淀或变形物质
用2倍柱体积的6M 盐*(代"酸")胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。

注意事项
1）请勿冷冻保存本产品。
2） Glutathione Agarose Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。