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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
204
- 英文名:
Prestained Protein Marker(43-200kD)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
- 规格:
10次
特别提示:包括预染蛋白Marker(43~200kD)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:预染蛋白Marker(43~200kD)
英文名称:Prestained Protein Marker(43-200kD)
产品货号:BTN70704B
产品规格:10次
本产品为蛋白质电泳标准系列,是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物,在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准,粗略估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.提供干粉型或溶液型,即开即用,非常方便。
2.预染色,在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动,也可以监测转膜效果。
3.可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4.本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围,单次上样,每个条带的浓度约为0.2μg/μL。
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 预染蛋白标准(低分子量) | 20T | - |
| 预染蛋白标准(高分子量) | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、干粉型的使用
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2.低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟,短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后,直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
3.使用时每次取一管,低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟,然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B),但由于共价结合了染料分子,各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白,所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量,一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量,则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102),以避免误差。
本系列产品所含成分及分子量分布
| 分子量范围 | 低分子量 | 高分子量 | |
| 肌球蛋白重链 | 200kD | 有 | |
| 钙调素结合蛋白 | 130kD | 有 | |
| 兔磷酸化酶B | 97.4kD | 有 | 有 |
| 牛血清白蛋白 | 66.2kD | 有 | 有 |
| 兔肌动蛋白 | 43kD | 有 | 有 |
| 牛碳*酐酶 | 31kD | 有 | |
| 人生长激素 | 22kD | 有 | |
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1kD | ||
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4kD | 有 | |
除了预染蛋白Marker(43~200kD),,我公司还供应以下相关产品:
名称:液体样品蛋白纯化回收试剂盒
货号:BTN121208
规格:50次
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。
产品特点:
1.适用于各种液体样品,包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏,对一般蛋白样品,zuì低浓度可达1μg/mL;对含SDS的样品,zuì低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%,远高于经典的丙*或*氯醋*沉淀法,且可有效去除样品中的脂质,不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性,没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速,只需要混匀后离心,不需要其他仪器。
7.产品稳定,可室温长期放置。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 0.5ml |
| 溶液B | 1ml |
| 溶液C | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
使用方法一(用于不含SDS的液体样品,但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1.将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2.加入10μL溶液A,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3.冰上放置15分钟。
4.加入10μL溶液B,轻轻混匀。
5.冰上放置60分钟。
6.4℃12000~15000×g离心10分钟。
7.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8.加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃12000~15000×g离心15分钟。
9.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
10.短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
11.样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品,但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1.将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2.加入8μl溶液B,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3.冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4.4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
5.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
6.加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
7.小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8.短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
9.样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
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文献和实验子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准, ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低蛋白标准分子量,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准,比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色
相关专题 蛋白marker产品选择指南 条带模糊: 电压过高或电泳时间过长,产热过多导致电泳缓冲液温度升高。建议参照Trans产品使用说明书。 电泳缓冲液陈旧,建议使用新鲜的电泳缓冲液,为了获得理想的结果建议在使用前将缓冲液预冷。 分离胶的浓度偏低,建议使用合适的胶浓度。 SDS-PAGE凝胶放置时间过长,建议使用新配制的凝胶电泳 。 带型不整齐: 建议点样时
问:新买了GelRed,比较贵,打算用节约的方法来使用,也就是把GelRed预混在上样缓冲液里,和样品混合后上样电泳。因此想请教一下有经验的站友: 1 假定使用6X上样缓冲液,应该以多大比例混合GelRed? 2 预混GelRed的上样缓冲液与核酸样品混合后,需要孵育一段时间还是可以直接上样? 3 预混在上样缓冲液中的GelRed是否稳定,是否可以长期存放,以及存放条件是室温,4度
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