丝状真菌线粒体蛋白提取试剂盒

特别提示：包括丝状真菌线粒体蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：丝状真菌线粒体蛋白提取试剂盒
英文名称：Reagents for mitochondrial protein extraction from filamentous fungi
产品货号：HR8088
产品规格：50T/100T

线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质-脂肪、糖、部分氨基酸在此进行zuì终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。
对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的，本试剂盒用简便快速的方法即可在1小时内提取得到线粒体蛋白。

储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

1．取500mg-1g 丝状真菌样本，采用以下其中一种方法处理：
I、加入3ml 提取液后用匀浆机/Dounce匀浆器匀浆。
II、置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入3ml冷的提取液。
III、加入3ml 提取液直接置冰上研磨。
2．将匀浆用250 目细胞筛或3 层纱布或脱脂棉过滤。或者在4℃，100×g 力条件下离心1分钟，收集上清，弃沉淀。
3．将滤液700g离心10分钟，取上清。
4．将上清11000g离心20分钟。
5．弃上清，留沉淀。
6．每200μl蛋白提取液B中加入1μl蛋白酶抑制剂混合物混匀。用200-400μl蛋白提取液B重悬沉淀，在4℃条件下振荡20分钟，至无明显沉淀。
7．在4℃，14000g条件下离心15分钟。
8．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到真菌线粒体蛋白。
9．将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
【注】
① 建议用BCA 法进行蛋白定量。
② 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

除了丝状真菌线粒体蛋白提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：十二烷基磺酸钠
货号：BTN131049
规格：100g
本产品是促进溶解的理想去垢剂。在SDS(十二烷基)中碳链长度的独特分布利于在凝胶电泳实验中溶解病毒蛋白。可用于需要在SDS-PAGE后进行复性的实验(如果按照Blank,等的方法处理凝胶来去除C14和C16烷基磺酸盐)。


储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

名称：Anti-V5标签亲和纯化凝胶
货号：SY0434
规格：1ml
Anti-V5 Affinity Gel（Anit-V5亲和纯化凝胶）由高质量的鼠源 IgG2b单克隆抗体与sepharose 4B gel 通过供价偶联制备，本产品具有较高的V5标签融合蛋白加载容量（至少为0.6mg protein/mL凝胶），杂蛋白非特异结合少，可用于带有V5标签的融合蛋白免疫沉淀（IP）和纯化。推荐使用量：每500μl蛋白粗体液需使用5μl凝胶。

亚型：Mouse IgG2b
纯化方法：Protein A
浓度：7.5g抗体/L凝胶
应用：蛋白纯化，免疫沉淀（IP）
蛋白结合量（Protein）：≥1.1 mg蛋白/mL凝胶
储存缓冲液：10 mM Na3PO4, 150 mM NaCl, 50% 甘油, pH 7.4，含有0.02%（w/v）叠氮钠
储存条件：-20℃，有效期1年

名称：两性电解质(pH3～10)
货号：QN1181
规格：12ml
纯度：40%
储存条件：RT

名称：组织线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒
货号：HR0155
规格：50T/100T
组织线粒体蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取线粒体蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳，请使用货号的试剂盒。

储存条件：线粒体试剂AB于2-8℃保存，长期存放于-20℃保存；试剂C和试剂D室温保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，从组织中提取蛋白不需经过反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
● zuì好使用 Dounce 匀浆器匀浆，如果没有Dounce 匀浆器，用普通1ml 玻璃匀浆器匀浆也可。也可采用超声破碎的方法，建议功率30w，10s。采用普通匀浆器或超声破碎，建议镜检，保证细胞80%以上的破碎率。

1．提取液准备：每200μl试剂C和试剂D中各加入1μl蛋白酶抑制剂混合物混匀备用。
2．取50mg组织样本剪碎。
3．加入 200μl冷的试剂A，置冰上10分钟。
4．Dounce 匀浆器匀浆30-40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6．在 4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
7．取步骤6的上清于另一干净离心管中，加入200μl试剂C 混匀，在4℃，11000×g以上条件下离心5分钟，取上清，即得胞浆蛋白。
8.在步骤6的沉淀中加入200μl冷的试剂B，混匀。
9.在 4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
10．弃上清。
11.在沉淀中加入80μl-150μl试剂D，置冰上20分钟，每隔5分钟高速涡旋振荡15秒。
12．即得线粒体蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
【注】：
① 建议用BCA法进行蛋白定量。
②蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。