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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 英文名:
转 Lectin 基因植物 PCR Mix
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100 次
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是转 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次品牌的相关产品:
L-(-)-葡萄糖(标准品)921-60-8质量规格:>98%,标准品
7-酮基去氢表雄酮566-19-8质量规格:>98%
硝酸铷13126-12-0质量规格:>99%
CHIR-99021 (CT99021.HCl)25
骆驼蓬碱;骆驼蓬灵;哈梅灵(标准品)304-21-2质量规格:HPLC≥98%,标准品
甘草酸二铵盐Diammonium Glycyrrhizate质量规格:UV≥97%,BR
橄榄苦苷(标准品)Oleuropein质量规格:HPLC≥98%,标准品
高丽槐素(标准品)Maackiain质量规格:HPLC≥98%,标准品
高良姜素(标准品)Galangin质量规格:HPLC≥98%,标准品
高三尖杉酯碱(标准品)Homoharringtonine质量规格:HPLC≥98%,标准品
腺苷-5'-三磷酸酯二钠盐质量规格:美国进口Adenosine 5'-triphosphate (ATP) disodium salt hydrate
腺苷 2′(3′)-单磷酸混合异构体 质量规格:美国进口Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers
腺苷5'-二磷酸核糖钠质量规格:美国进口Adenosine 5'-diphosphoribose sodium salt
8-叠氮-环二磷酸腺苷-核糖质量规格:美国进口8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose
8-氨基腺嘌呤核苷质量规格:美国进口8-Amino Adenosine
小鼠ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)ELISA试剂盒 ,英文名: ABCA1 ELISA Kit
人抗软骨抗体(ai-cailage-Ab)ELISA检测试剂盒Humanai-cailage-aibodyELISAKit 96T/48T
大鼠富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)免疫试剂盒 Rat leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,LRG1 ELISA Kit
CLIAKitforUU-Ab(MouseUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit小鼠解脲脲原体抗体规格:48T/96T
内质网形态高质染色试剂盒20次
ELISAKitHTLV-Ⅰ人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒规格:48T/96T
小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human membrane cofactor protein (MCP/CD46) ELISA Kit 人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA试剂盒
Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA试剂盒山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次
MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit小鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
转 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次品牌小鼠前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作步骤:
1. 转 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验浓度不同,两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中,主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后,高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA,单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板(1ng/μL)(质粒 R-pGEX-4T-1,R 指代外源基因) 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2(5pmol/μL) 引物
随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现。尤其是 PCR 技术问世以后,各种与 PCR 相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展。如不对称 PCR 产物的直接测序 、核糖核酸酶酶切法 (Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性片段长度多态性分析 (Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP) 等等已成为基因分析的有力工具。但这些方法操作比较繁琐,局限性较大,或要求实验条件高,不适合一般临床
用ReadyMixTM PCR Reaction Mix进行拟南芥SSLP
用ReadyMix TM PCR Reaction Mix 进行拟南芥SSLP (32 个样品+3 个对照) 一、PCR 采用SIGMA REDTaq® ReadyMixTM PCR Reaction Mix提供的 试剂 (包括20 mM Tris-HCl, pH 8.3, 100 mM KCl, 3 mM MgCl2, 0.002% gelatin, 0.4 M dNTP
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