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50
- 英文名:
miRNA cDNA 第一链合成试剂盒
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
25 次
1)miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次费用客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次费用的详细介绍点击了解更多核酸扩增产品:

储存事项:
A. miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次费用组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤:
(1) miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
氯舒隆6
氯舒隆(标准品)6
L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐;Vc磷酸酯钠6
IBMX, 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤28822-58-4质量规格:>99%,美国进口
盐酸普鲁卡因18756质量规格:>99%,BR
加巴喷丁-d4Gabapentin-d4质量规格:美国进口
加巴喷丁-内酰胺Gabapentin-lactam质量规格:美国进口
加巴喷丁相关化合物BGabapentin Related Compound B质量规格:美国进口
加巴喷丁相关化合物EGabapentin Related Compound E质量规格:美国进口
加巴喷丁相关化合物DGabapentin Related Compound D质量规格:美国进口
依替米星(标准品)质量规格:效价测定Etimicin
巴龙霉素(标准品)质量规格:效价测定Paromomycin
替考拉宁(标准品)质量规格:效价测定Teicoplanin
制霉菌素(标准品)质量规格:效价测定Nystatin
肌苷5'-单磷酸质量规格:>98%,BRInosine 5'-Monophosphate(IMP)
小鼠DNA甲基转移酶1 (DNMT1) ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
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HumanPyruvateKinase,M2-PKELISAKit人同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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小鼠胃泌酸调节素(OXM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠胃泌素(GT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
miRNA 是一种既可爱又可恨的小东西,它们深居简出,它们飘忽不定,它们似乎总是在和我们捉迷藏,当我们费尽力气以为即将要将它们掌控的时候,它却又顽皮的从我们的指缝中溜走,而我们却又毫无办法。同学莫怕,TIANGEN 即将上市的最新产品 miRcute 增强型 miRNA cDNA 第一链合成试剂盒(KR211)与 miRcute 增强型miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)(FP411)这对黄金搭档轻松解决所有问题,反转加A一步完成,高灵敏度检测试剂让低丰度miRNA清晰
cpm/总cpm ×100% 掺入dNTP(nmol)=2nmol dNTP/μl ×反应体积(μl)×(第一链掺入率) 设330为每mol dNTP的平均分子量 合成cDNA量(ng)=掺入dNTP (nmol)×330ng/nmol mRNA向cDNA转变率=合成cDNA量(ng) / 模板RNA量(ng)×100% 例如总放射性活性强度为254,000cpm, 掺入放射性活性强度为3040cpm, 所用RNA摸板量为1μg,反应体积为25μl, 则: 掺入率=3040
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