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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 英文名:
Tissue RNA Purification Kit PLUS
- 保质期:
有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
Lysis Buffer置于2 ~ 8°C避光保存,其余组分室温保存。
- 规格:
100 Preps
产品简介
本产品基于苯酚/胍的样品裂解和二氧化硅膜纯化,可从动物组织和细胞中纯化高质量的总RNA。纯化后的总RNA适用于多种下游应用,包括:RT-PCR、RT-qPCR、Northern印迹、核酸酶保护测定、poly(A)+选择后的cDNA文库制备等。
产品组分
|
组分 |
EZB-RN001-plus (100 Preps) |
|
Lysis Buffer |
55 ml |
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Wash Buffer 1*1 |
13 ml |
|
Wash Buffer 2*1 |
13 ml |
|
Elution Buffer |
10 ml |
|
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) |
100 Preps |
注:*1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前,请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀,加好混匀后可在瓶身做好标记。
保存条件
Lysis Buffer置于2 ~ 8°C避光保存,其余组分室温保存。有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
产品特点
1. 纯度高、完整性好:OD260/280和OD260/230都在1.9 ~ 2.3之间,RNA质量可达到Aligent 2100 RNA质检的要求。完全适用于下游实验如RT-PCR、RT-qPCR、测序、cDNA文库构建、跑胶等实验。
2. 提取能力强:既可以用于多种类型组织RNA的提取(肌腱、骨骼等组织),又可以用于多种细胞RNA的提取。
3. 适用性广:不仅适用于mRNA的提取,也可用于lncRNA和circRNA的提取。
4. 所需样品少:最低可提取2万细胞或者1 mg组织的RNA。
实验流程

注意事项
1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前,请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀(Wash Buffer 1和Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4)。
2. Elution Buffer使用前建议分装为3 ~ 4份保存,以减小污染的概率。
3. 本试剂盒中离心的过程都是在4°C的离心机中进行,其余的操作步骤都是在室温中进行,所以实验前需提前预冷离心机。
4. 样品充分裂解后,如果不打算继续进行RNA提取,可将裂解产物转移到EP管中冻存在-80°C,下次解冻后恢复到室温使用,加氯仿混匀,继续进行后续的步骤即可。
5. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上(如果洗脱液加到侧壁上,会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少),同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
6. 如果提取高脂肪含量组织(例如肝脏、脂肪组织、脑组织)的RNA,则建议使用货号为“EZB-RN001A”的RNA提取试剂盒,以获得更好的纯度。
7. 本产品适用于从动物组织或细胞中提取纯化高质量的总RNA。
8. 关于组织用量,可参考如下表格:
|
组织种类 |
肿瘤、胚胎、心、肾、脾、胰脏、肺、眼 |
肌肉、皮肤、血管 |
|
参考用量(mg) |
5 ~ 50 |
20 ~ 50 |
代表性实验结果
1. 用本产品从30 mg小鼠肌肉组织中提取的RNA用Nanodrop检测的结果(30 μl Elution Buffer洗脱)

左图:用本产品提取的RNA具有很好的纯度和较高的浓度。
右图:从30 mg小鼠肌肉组织中提取RNA用琼脂糖凝胶电泳检测的结果(30 μl Elution Buffer洗脱/溶解RNA,取5 μl上样)。M:250bp DNA Ladder,Lanes 1、2为本产品提取的RNA;Lanes 3、4为TRIzol (Invitrogen)方法提取的RNA。由右图可见:Tissue RNA Purification Kit PLUS提取RNA的得率明显高于TRIzol方法。
2. 本试剂盒用于提取lncRNA的qPCR测试结果请见下图

由上述qPCR的检测结果可见,本试剂盒能够很好的用于lncRNA的提取。
相关详细信息,请查看产品说明书。
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文献和实验实验概要 提取样品组织中的RNA并消除DNA污染 实验原理 Trizol裂解细胞使RNA释放 beta巯基乙醇一直RNase活性 酚-氯仿抽提分离RNA RNase-Free DNase消除DNA污染 主要 试剂 Trizol 无水乙醇 氯仿(三氯甲烷) 异丙醇 RQ1 RNase
小硕,刚进实验室不久,自己想的课题,外加老婆的建议和帮助下,RT-PCR外加琼脂糖电泳顺利跑了下来,前两天标本的目的基因及内参都P出来了,内心小高兴一把。图未上,等拷回来补传上来。虽然还有小毛病,但是起码还是有点结果了。说说肺组织提RNA,是癌旁5CM以及肿瘤组织切下来放液氮中冷冻,后转-80度冷藏。标本是守在手术室里面,一切下来就取的,不存在RNA降解问题。前期的标本是直接放进2ml离心管里面的,后来在从2ml离心管取出组织的时候才发现组织在冷冻的情况下与离心管粘连严重,难以分离(组织块太大
从植物组织中提取RNA 是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA 以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学研究,都需要高质量的RNA 。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA 是顺利进行上述研究的关键所在。 从文献报道上看,有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中的RNA ,而阻碍了其分子生物学方面研究的进展。一般认为在这些植物组织中,或富含酚类化合物,或富含多糖,或含有某些尚无法确定
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