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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
液态或冻干粉
- 保存条件:
低温
- 标记物:
FITC标记抗体
- 供应商:
圻明生物
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
Anti-STK2/FITC
规格:100ul
浓度:1mg/ml
研究领域:免疫学 神经生物学 激酶和磷酸酶 表观遗传学
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep,
相关标记抗体:辣根过氧化物酶标记抗体,生物素标记抗体,胶体金标记抗体,红色罗丹明(RBITC)标记抗体,橙黄色PE标记抗体,绿色荧光素(FITC)标记抗体等。
圻明生物公司所售产品仅供科研试验。
FITC标记的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2抗体用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。
作为标记的荧光素应符合以下要求:
①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。
②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。
③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。
④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质。
⑤标记方法简单、安全无毒。
⑥与蛋白质的结合物稳定,易于保存。
生长因子和激素(Growth Factor and Hormones) 血管内皮细胞生长因子(VEGF)是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,它能引起血管通透性增加,引起细胞外基质成分改变,诱导血管形成。在炎症、创伤愈合、心脏缺血、动脉粥样硬化、糖尿病性视网膜病变及肿瘤形成等与血管生成和病变有关的诸多病理过程中起重要作用,VEGF与血管生成有关,从而也与肿瘤生长也有很大关系,近年来受到很多关注。
FITC标记的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2抗体免疫印迹操作-转膜
1).将凝胶玻璃板置于盛有电泳转移缓冲液的容器中,浸泡15 20min.。
2).带上手套,裁剪好滤纸(Whatman, 3MM CHR)和电转膜,滤纸和膜大小为83mmX 75mm,尽量避免污染滤纸和膜,将裁减好的滤纸和膜浸泡与电泳转移缓冲液中,驱除留于膜上的气泡。
3).打开转移盒并放置浅盘中,用转移缓冲液将海绵垫完全浸透后将其放在转移盒壁上,海绵上再放置- -张浸湿的 Whatman, 3MM滤纸。
4).小心将凝胶放置于滤纸上,避免气泡(用转移缓冲液润湿并戴手套以转移缓冲液润湿胶面,小心将电转膜放在胶面上,从凝胶的一边开始轻轻放下可避免气泡,注意- -定要戴手套或镊子接触膜)。
5).用去离子水清洗缓冲液槽,在缓冲液槽中放入搅拌子,将另一块海绵用转移缓冲液浸透后放在凝胶膜“三明治”上,关上转移盒并插入转移槽。
6).将冰盒装入缓冲液槽,注满4'C预冷的转移缓冲液。
7).将整个装置放在磁力搅拌器上并开始搅拌,连接好转移电极恒流300mA转移70min。
8).电转完毕后,将电转膜置于5%的脱脂奶粉(PBS 配制)中封闭,37*C2 小时或4C过夜。
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文献和实验反应发生的风险,故而在合成磷酸化多肽时,需要对氨基酸投料量、反应方法以及反应时长等进行优化调整以期达到更理想、更经济的合成效果。我们有针对性地对磷酸化多肽合成条件进行了探索和调整,采用最终的优化条件成功合成了含有多达六个磷酸化丝氨酸残基的多肽:FAM-Ahx-X(pS)XX(pS)X(pS)X(pS)XX(pS)X(pS)-NH2(客户肽,详细序列未给出;其氨基端标记FAM以进行荧光检测),经过RP-HPLC纯化后最终纯品的纯度高达95%(见Figure 3)。 参考文献: 1. P
1. 前言 蛋白质翻译后磷酸化修饰是影响真核细胞每一个细胞内活动过程的最丰富的细胞调节形式。一个蛋白质的磷酸化能引起结构、稳定性、酶活,与其他分子之间相互作用的能力或其亚细胞定位的改变。蛋白激酶催化可逆的蛋白质底物的磷酸化,作用在其丝氨 酸、苏氨酸和酪氨酸残基位点上。如在拟南芥中,丝氨酸/苏氨酸激酶占整个蛋白质组 的 4% [1] ,但对它们的生物学功能还不十分了解。因此,我们需要能开展蛋白激酶全球分析的高通量蛋白质组学方法[ 2,3] 来鉴定下游底物。 用于确定磷酸化共有
化程度会显著降低[ 3 ] 。[ 32 P]放射性标记可以非常灵敏、直观地检测磷蛋白,尤其是与二维凝胶电泳结合后可以从蛋白质组的角度整体观察细胞内蛋白质磷酸化程度的变化,它的缺点是不能标记组织样本,并且存在放射性污染的问题。 2. 2 免疫印记和免疫沉淀 通过抗磷酸氨基酸抗体与磷酸化蛋白质的免疫印迹反应(Western blotting)来检出磷酸化蛋白质是较常用的方法。在真核细胞中最常见的磷酸化修饰是在蛋白质的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基侧链
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