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- Prospec
- 进口
- CYT-654
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8°C
- 保质期：
1年
- 英文名：
重组人白介素-18，His标签
- 库存：
999
- 供应商：
南京赛泓瑞
- 规格：
/5ug/20ug/1mg
Recombinant Rat Ciliary Neurotrophic Factor
英文简称:
rCNTF
中文名称:
重组大鼠睫状节神经营养因子
背景资料:
睫状神经营养因子（Ciliary Neurotrophic Factor；CNTF）因最初从鸟睫状神经节中提取出来，可维持副交感神经节活性而得名，后显示能促进其他神经元细胞类型生存，也能在体外促进双潜能O-2A祖细胞向Ⅱ型星形细胞分化.现认为是白介素-6细胞因子家族成员之一.作为IL-6家族细胞因子成员之一，CNTF主要表达于周围神经系统神经膜细胞和中枢神经系统星形胶质细胞，在神经损伤后释放，可促进神经元存活与再生.另外CNTF可以模仿瘦素在下丘脑效应，也成为减肥药研究重要靶点之一.
产品描述:
大鼠睫状节神经营养因子重组蛋白是在大肠杆菌中重组表达的，是一条单链、非糖基化的多肽链，包含有200个氨基酸，分子量为22834Da.该大鼠睫状节神经营养因子 重组蛋白最终由标准的色谱技术纯化出.
来源宿主:
大肠杆菌中重组表达
序列:
AFAEQTPLTL HRRDLSSRSIWLARKIRSDLTALMESYVKHQGLNKNI NLDSVDGVPVASTDRWSEMTEAERLQENLQAYRTFQGMLTKLLEDQRV HFTPTEGDFHQAIHTLMLQVSAFAYQLEELMVLLEQKIPENEADGMPA TVGDGGLFEKKLWGLKVLQELSQWTVRSIHDLRVISSHQMGISALESH YGAKDKQM.
溶解建议:
提供的大鼠睫状节神经营养因子 （rCNTF）产品为过滤灭菌的白色冻干粉末；该冻干粉末是从含1mg/ml大鼠睫状节神经营养因子 （rCNTF）的0.025% NaHCO3溶液中冻干产生的.我们建议在无菌水或0.4% NaHCO3（pH 8-9）溶液中溶解，使其浓度不低于100ug/ml，后继实验过程中可根据实验要求进一步稀释，建议添加载体蛋白.
保存建议：
大鼠睫状节神经营养因子 （rCNTF）冻干粉末在室温可保存3周，或置于-18℃冻存用于长期保存.重新溶解后可以在4℃冷藏保存至少2-7天以上；如果想延长保存时间，建议分装后置于-18℃冻存.请避免反复冻融.
其他简介：
ProSpec是一家全球著名细胞因子蛋白及相关抗体生产和研发品牌。ProSpec的生产和研发工厂位于以色列，专注于蛋白（重组及合成）生产研发，其独有的细菌和哺乳动物表达和蛋白折叠技术使其能在17年内成长为国际的科研级蛋白供应商。目前ProSpec可以提供细胞因子，生长因子，激素，信号蛋白，病毒抗原等近800种重组蛋白和100多种抗体，是世界上提供蛋白品种最多的公司之一，领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白，价格优于同类公司。绝大部分产品是天然成熟型蛋白，而不含有标签蛋白。考虑到大部分研究者希望能更灵活地配制蛋白溶液，ProSpec-Tany绝大部分产品没有添加保护剂或盐，这就对工艺提出了更高的要求。同时，ProSpec-Tany绝大部分产品为冻干粉，因此易于运输和保存。
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文献和实验编码区的基因片段，其由5'末端的stat密码子（ATG）和3'末端的终止密码子（TAA，TAG或TGA）结合。然后将目的基因片段插入pMD18-T载体中以构建重组质粒，通过DNA测序鉴定。用指定的酶消化重组pMD18-T质粒，并通过以下方案将检索到的目的DNA片段亚克隆到pET-32α（+）载体中以产生重组表达载体。将约129bp的TBO基因片段插入pET-32α（+）载体（5900bp）用相同的限制酶在37℃消化pET-32α（+）载体和重组pMD18-T载体1小时，然后通过在65℃温育10分钟
，cDNA的数量和复杂度要少得多。因为其较高的特异性，oligo(dT)一般不需要对RNA和引物的比例及poly(A)+选择进行优化。建议每20μl反应体系使用0.5μg oligo(dT)。oligo(dT)12-18适用于多数RT-PCR。 基因特异性引物（GSP）对于逆转录步骤是特异性最好的引物。GSP是反义寡聚核苷，可以特异性地同RNA目的序列杂交，而不象随机引物或oligo(dT)那样同所有RNA退火。用于设计PCR引物的规则同样适用于逆转录反应GSP的设计。GSP
。当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点：1.标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解
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