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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Monzol™ Reagent
- 供应商:
莫纳生物
- 规格:
100 ml
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文献和实验本期专文要来跟大家讨论的话题是核糖核酸(RNA)的萃取,看到这里各位心中可能已经起了疑问:RNA 萃取不是很简单吗?只要照着标准步骤操作,加一加试剂就完成了,有必要大费周章特地开篇幅来谈这件事吗?其实越简单的东西遇到困难时就越难解,各位看倌就请耐着性子,听我们娓娓道来。Lab 的经验和客户的难题 以华联基因体实验室的长期以来承接客户RNA检体的经验来说,我们经常遇到的问题是: (1)RNA的总量不够 (2)RNA有严重的盐类污染 (3)RNA
对大部分实验人员来说,RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢? 组织 RNA 抽提失败的两大现象是: RNA 降解和组织内杂质的残留。关于降解问题,首先看一下为什么从培养细胞中抽提 RNA 不容易降解。现有的 RNA 抽提试剂,都含有快速抑制 Rnase 的成分。在培养细胞中加入裂解
3、试剂配制和准备: (1)DEPC水:泡实验器具的DEPC水的配制:1000ml双蒸水中加1mlDEPC,放在1000ml容量瓶中静置4小时后备用。配75%乙醇的DEPC水的配制:100ml盐水瓶内装40ml双蒸水,加40ulDEPC,37℃过夜,送至高压。 (2)75%乙醇(要在抽提时现配):用无水乙醇和DEPC水配制(DEPC水:无水乙醇=1:3),然后放于-20℃备用。 (3)异丙醇:放入棕色瓶 (4)氯仿:放入棕色瓶 (5)Trizol:100ml/瓶存放
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