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文献和实验5. 加入1.25ml 冰浴Buffer N3,并温和颠倒离心管数次至形成白色絮狀沉淀。准备好过滤器。 6. 把HiBind中量柱套在收集管中,加入2ml Buffer GPS至柱子中,静置3- 10min。室温3000-5000xg离心5分钟。去滤液,把柱子重新放回收集管中。 7. 将裂解液倒进预先准备好的针筒过滤器中(针筒开口朝上,下面出口处接收集管),静置2min。 8. 插入并轻推活塞使裂解液流进下面的收集管中。 9. 在过滤澄清的裂解液中
浓缩收集,浓缩后浓度达到浓缩前的 20 倍。该过滤浓缩系统使用兰格蠕动泵产品 BT600-2J 驱动器/YZ2515X 泵头/Pharmed 15# 软管,用于驱动滤液通过过滤器,并提供跨膜压,使溶液中多余的水分子及其他小分子 (无色透明) 通过超滤膜,收集在锥形瓶中。而金缀合抗体 (红色),因其分子量大,无法通过超滤膜,在蠕动泵的驱动下,回流至收集瓶中。客户需求1. 系统泵送滤液时,要保证生物分子的完整性和活性。2. 泵送溶液流量:40 mL/min, 但随着浓缩的进行,溶液密度增加,需要
5. 准备结合柱——加5ml的Buffer GPS至结合柱中,室温放置3-10min,3,000-5,000×g离心5min,弃滤液,往柱子里加入10ml无菌水离心弃滤液后,把柱子插入50ml收集管中。 6. 把第4步中获得的溶液及沉淀物全部转移至针筒式过滤器中,室温放置2min后推压过滤器,用一个新的50ml离心管收集滤出的清液(此步可用“15,000×g 4℃离心10min得上清”代替)。 7. 第6步获得上清液后,加入与上清等体积的ETR Binding Buffer,颠倒
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