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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
45
- 英文名：
RNase-free 75% 乙醇
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250mL
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
点击了解更多RNA纯化产品：
RNase-free 75% 乙醇250mL规格详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是RNase-free 75% 乙醇250mL规格的相关产品：
大片段 DNA 分子量标准50μg 凝固血液 DNAout30 次
脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次 凝固血液 DNAout100 次
脉冲电泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次 镍柱介质2mL
脉冲电泳 Marker( 低范围 PFG)50 次 镍柱介质10mL
超螺旋 DNA 分子量标准100uL 尿道上皮细胞生长因子5mL
暗盒 (5×7 英寸 )1个 红霉素溶液 ,100mg/mL10mL
暗盒 (8×10 英寸 )1个 黑色素细胞生长因子5mL
DNA 包被溶液100mL 黑色素细胞生长因子 - 不含 TPA5mL
X 光片 (5×7 英寸 )1盒 核酸印迹膜染液100mL
X 光片 (8×10 英寸 )1盒 核酸稀释液，测 OD 专用100mL
高 GC DNA 清除剂，PCR 级1.5mL 硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )1套
MnCl2溶液，25mM，PCR 级5mL 硅基磁珠2mL
甲酰胺，PCR 级5mL 固相内毒素清除剂500g
MgSO4溶液，10mM，PCR 级5mL 固相内毒素清除剂100g
石蜡油，PCR 级10mL 固相 RNase 清除剂250mL
3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 英文名称； 3% NaCl Tryptic Soy Agar 规格； 250g
3%氯化钠三糖铁(TSI)琼脂 英文名称； 3%TSI Agar 规格； 250g
3%nacl赖氨酸脱羧酶 英文名称； Sodium chloride lysine decarboxylase test medium 规格； 20支
3%氯化钠MR-VP培养基 英文名称； 3% NaCl MR-VP Medium 规格； 20支
氧化酶试剂 英文名称； 规格； 1g
麦康凯肉汤USP颗粒 MacConkey Broth Medium 250g
玫瑰红钠琼脂培养基颗粒 Rose Bengal Agar Medium 300ml/袋*10
10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基颗粒 10% Trypticase Soy Broth 225ml/袋*10
麦康凯琼脂（中国药典）颗粒 MacConkey Agar Medium 250g
大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）颗粒 Tryptose Soya Agar 300ml/袋*10
RNase-free 75% 乙醇250mL规格肠球菌琼脂 用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养用途用于肠球菌的快速选择性的分离培养和计数。成分（g/L）蛋白胨 3.0g胰酪蛋白胨 17.0g酵母粉 5.0g牛胆粉 10.0g氯化钠 5.0g七叶苷 1.0g柠檬酸铁胺 0.5g 0.25g柠檬酸钠 1.0g琼脂 13.5gPH值 6.9-7.3用 法称取本品 56.25克， 加热溶解于1000ml蒸馏水中， 121℃高压灭菌15分钟备用。
滤膜肠球菌琼脂 用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数用途:用于水或其它样品中肠球菌滤膜法分离或计数。用法称取本品 42.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,冷至 45-50℃时,倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌。
CATC琼脂 用于食品和饮料肠球菌的分离培养用途:用于食品和饮料中肠球菌的分离培养。用法称取本品 58.5g,加热煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,冷至 50~55℃时,倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌。
胆盐七叶苷琼脂 用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养用途:用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养。成分(g/L)蛋白胨 8.0牛胆盐 20.0柠檬酸铁 0.5七叶苷 1.0琼脂 15.0pH值7.1 ± 0.2 25℃用法称取本品 44.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
操作步骤:
1. RNase-free 75% 乙醇250mL规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验采用50nM 佛波脂 phorbol ester (PMA) 提前24小时诱导处理使c-FOS 表达水平升高。用由RNase III 消化c-FOS 双链RNA 得到的siRNA s 混合物转染293细胞，用同样方法检测对基因表达的抑制效果。结果显示用RNase III 消化各种双链RNA 得到的siRNA 库对相应的基因表达抑制效果分别是：GAPDH 表达水平下调78% ，La 表达水平下调86% ，而c-FOS 表达水平则下调75% 。这个结果表明RNase III 得到的siRNA s 库
RNase Protection Assay--RNA酶保护试验
仿，混匀，离心10000g×2min。将上层液转移至另一0.5ml 离心管中，再加入3M NaAc 10μl、预冷无水乙醇250μl，混匀后，-20℃静置30min。4℃离心13500g×10min。弃上清液，沉淀用75%乙醇100μl洗涤，4℃离心13500g×2min, 弃上清液。室温下挥发残留乙醇。加入50μl杂交缓冲液溶解沉淀，4℃下保存待用。可用尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测探针质量。2．杂交 （1） RNA提取后溶解在杂交缓冲液中，浓度为1μg/μl。 （2）取8μl RNA加入1-3μ
变成CO2和水，再加上乙醇也很容易气化，可能是因为有气体产生吧，如果盖子太紧容易发生瓶子破掉的事情。（我还从来没有听说过把乙醇高温灭菌过）而且，湿热灭菌本身不足以去除RNA酶，所以我觉得有时候，灭菌可能反而引入RNA酶污染也不一定哦 75%的乙醇用于提取RNA 时最好还是现用现配，乙醇最好是新的且以后不要用于其他方面，也就是留一瓶专门用于提取RNA。DEPC一般高压灭菌30分钟就可以了！ 75%乙醇：灭菌后的千分之一DEPC水25ml+75ml无水乙醇.配好后装入高温烘烤的玻璃瓶中（160干
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