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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
硝酸纤维素膜,
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
13×20cm1
(1) 硝酸纤维素膜,13×20cm1张费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是硝酸纤维素膜,13×20cm1张费用的详细介绍点击了解更多探针标记及检测产品:

储存事项:
A. 硝酸纤维素膜,13×20cm1张费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 硝酸纤维素膜,13×20cm1张费用组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
雷帕霉素/西罗莫司(标准品)53123-88-9质量规格:HPLC>98%,标准品
甲磺酸雷沙吉兰161735-79-1质量规格:>98.5%
白藜芦醇501-36-0质量规格:>97.0%,BR
白藜芦醇(标准品)501-36-0质量规格:HPLC≥99%,标准品
瑞替加滨碱15
银杏酸C15:1Ginkgolic Acid C15:1质量规格:HPLC≥80%,美国进口
银杏酸C13:0,白果酸C13:0Ginkgolic Acid C13:0质量规格:HPLC≥98%,标准品
AZD9291AZD-9291(free base)质量规格:>98%,EGFR抑制剂
AZD9291 MesylateAZD-9291 mesylate质量规格:>98%,EGFR抑制剂
乳酸链球菌素;乳链菌肽;尼生素Nisin质量规格:BR,效价>900IU/MG
盐酸依匹斯汀质量规格:>98%,BREpinastine HCl
盐酸依匹斯汀(标准品)质量规格:>99%,标准品Epinastine HCl
依普利酮质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养Eplerenone
依普利酮(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Eplerenone
*度酸质量规格:>98.5%,BREtodolac
白色念珠菌冻干粉 金黄色葡萄球菌ATCC43300冻干粉
猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种 拟康氏木霉
空肠弯曲杆菌 粗糙链孢霉
恶臭醋酸杆菌混浊变种 醋酸菌 氧化已醇产醋酸
银丝菇、丝盖小包脚菇 苏云金芽孢杆菌
刺孢吸水链霉菌昆明变种 忍冬木层孔菌
粉红单端孢霉 科恩根霉
浅灰链霉菌 卷枝毛霉
土生拉乌尔菌(土生克雷伯菌) 肠膜明串珠葡萄聚糖亚种
嗜热脂肪芽孢杆菌AS1.1923冻干粉南京便诊 粘红酵母
硝酸纤维素膜,13×20cm1张费用多头霉 营养肉汤培养基7ml
玫烟色拟青霉 黑曲霉
苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki 苏云金芽胞杆菌鲇泽变种 Bacillus thuringienis var. aisawai
山梨醇发酵管5ml 30 支/盒 黄柄曲霉
大球盖菇 吸水链霉菌紫色变种
服务流程:
1)硝酸纤维素膜,13×20cm1张费用客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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文献和实验转膜篇 1. 转一张膜需准备 6 张 7.0~8.3 cm 的滤纸和 1 张 7.3~8.6 cm 的硝酸纤维素膜。切滤纸和膜时一定要戴手套,因为手上的蛋白会污染膜。将切好的硝酸纤维素膜置于水上浸 2 h 才可使用。 要领: (1)用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里,要使膜浮于水上,只有下层才与水接触。这样由于毛细管作用可使整个膜浸湿。若膜沉入水里,膜与水之间形成一层空气膜,这样会阻止膜吸水; (2)个人感觉其实转膜之前浸湿一下就 ok 了,没有
起,DNA 已开始转移。(11)将两张预先用 2 × SSC 湿润过的与硝酸纤维素膜在大小相同的 Whatman 3mm 滤纸覆盖在硝酸纤维素膜上,排除气泡。(12)裁剪一些与硝酸纤维素膜大小相同或稍小的吸水纸,约 5 ~ 8cm 厚。将之置于 Whatman 3mm 滤纸之上。在吸水纸之上置一玻璃板,其上压一重约 500g 的物品。(13)静置 8 ~ 24 小时使其充分转移,其间换吸水纸 1~2 次。(14)弃去吸水纸和滤纸,将凝胶和硝酸纤维素膜置于 1 张干燥的滤纸上。用软铅笔或圆珠笔标明加样
相关专题 本文主要介绍了Northern印迹杂交(Northern blotting)实验的原理、器材和具体方法步骤。Northern blotting是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。 Northern blotting 1.原理 Northern印迹杂交(Northern blotting)将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹
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