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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
59
- 英文名:
超级杂交液 (Oligo 探针 )
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10mL
超级杂交液 (Oligo 探针 )10mL品牌详细介绍:

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是超级杂交液 (Oligo 探针 )10mL品牌的相关产品:
瑞替加滨150812-13-8质量规格:HPLC>95%,
利巴韦林3
利巴韦林(标准品)3
硫酸核糖霉素53797-35-6质量规格:≥630µg/mg,BR,可用于细胞培养
利福布丁7
银杏内酯C(标准品)Ginkgolide C质量规格:HPLC≥98%,标准品
银杏内酯J(标准品)Ginkgolide J质量规格:HPLC≥98%,标准品
隐丹参酮(标准品)Cryptotanshinone质量规格:HPLC≥98%,标准品
隐丹参酮Cryptotanshinone质量规格:HPLC≥97%,BR
牛磺鹅去氧胆酸(标准品)Taurochenodeoxycholic acid质量规格:HPLC≥98%,标准品
盐酸伊立替康(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Irinotecan HCl Trihydrate
硝酸异康唑质量规格:>99%,BRIsoconazole Nitrate
硝酸异康唑(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Isoconazole Nitrate
异维A酸质量规格:>99.0%,BRIsotretinoin
异维A酸(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Isotretinoin
巴西毛壳 戴尔根霉
产黄纤维单胞菌 肺炎克雷伯菌冻干粉
蜜粘褶菌=革裥菌 乳酸乳球菌乳酸亚种
赭曲霉 苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki
苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis 两型孢毛霉
产色链霉菌 肠膜明串珠葡萄聚糖亚种
苏云金芽孢杆菌猝倒亚种 平盖灵芝(树舌)
宇佐美曲霉 蛎灰链霉菌
大秃马勃 苏云金芽胞杆菌东北亚种Bacillusthuringiensissubsp.tohokuensis
化脓性链球菌 金黄色葡萄球菌金黄色亚种
超级杂交液 (Oligo 探针 )10mL品牌地衣芽孢杆菌 隐甲藻
胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)70mm 浮游球衣菌 producesrestrictionendonucleaseSnaBI生产限制性核酸内切酶SnaBI
塔宾曲霉 泛养副球菌
粘质沙雷氏菌 拟康氏木霉
铜绿假单胞菌冻干粉 黑化链霉菌
操作步骤:
1. 超级杂交液 (Oligo 探针 )10mL品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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文献和实验OLIGO PURIFICATION on acrylamide gels
GEL PURIFICATION OF OLIGONUCLEOTIDES (Adapted from the method of Mark Fortini) 1. Quantitate crude oligo solution via UV spectrophotometry. Assume 1.0 A260 unit is equal to 33μl/ml. Dry down 100μl of oligo on speedi-vac overnight. 2. Resuspend
3.预杂交和杂交加约300μl预杂交液(配制法见附录)在每张载片上,室温孵育1h。如为鲱鱼精子DNA,在应用前须在沸水浴中加热10min,而对酵母tRNA可不用加热变性。 (1)应用预杂交液稀释地高辛标记的Oligo-探针,探针理想工作浓度根据于待测核苷酸含量和实践的结果。如对于检测大鼠垂体的前促黑激素(proopiomelanocortin,POMC)mRNA的Oligo –探针,其理想工作浓度为342ng/ml(0.342ng/μl)。 (2)预杂交后以2×SSC漂洗
给予该实验最大信噪比,因为背景着色度高低与探针浓度有关。最佳探针浓度是最低探针浓度达到靶核酸的最大饱和结合度为目的。探针浓度按其种类而略有不同,放射性标记cRNA探针的浓度为0.5 ng/μl,而非放射性标记cRNA探针的浓度1.0 ng/μl 。杂交液的量要适当,每张切片以30-50 μl为宜。保持杂交液不流失的关键是,载玻片的清洁处理必须彻底,应用杂交罩等也很必要。3. 杂交的温度和时间 设置和调整杂交温度是RNA原位杂交的重要环节。杂交温度应低于解链或融解温度(melting
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










