1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液

特别提示：包括1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
英文名称：1×SDS-PAGE loading buffer
产品货号：KFS082
产品规格：10ml

本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer，适用于变性聚丙*酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料， 1×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液，用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。

操作步骤
1. 针对浓缩的蛋白沉淀样品，可直接用1×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液重悬，根据浓缩样本的蛋白质量，加入合适体积的1×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液，得到所需的蛋白浓度即可。（注意：有些蛋白样本可能因为浓缩沉淀导致难以重溶，可以适当考虑增加6M 的尿素助溶）
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟，以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟，10000rpm 离心1 分钟，取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。

除了1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液,，我公司还供应以下相关产品：



名称：蛋白酶抑制剂混合液
货号：BTN80808
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量的内源性蛋白酶，引起蛋白质的降解，影响试验结果。加入外源性蛋白酶抑制剂，抑制蛋白酶的活性，防止蛋白降解，已经成为蛋白质研究的常规操作。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝氨酸蛋白酶(Serine Protease)、半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease)、天门冬氨酸蛋白酶。
3.与各种细胞裂解液兼容，可以共同使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：临用前室温融解蛋白酶抑制剂复合物(100×)，混匀，按照1:100 比例加入到组织细胞裂解液中。

注意事项：
1.蛋白酶抑制剂复合物在水溶液中极不稳定，15分钟即可水解掉～50%的活性，需临用前加入。
2. 避免反复冻融，可分装储存。

名称：1.5M Tris(pH8.8)
货号：RFT059
规格：100ml|500ml
本品用于SDS-PAGE配制分离胶用。

名称：10×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液
货号：KFS058
规格：500ml
本产品作为蛋白电泳缓冲液，含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。适用于变性聚丙*酰胺凝胶电泳。

使用时用蒸馏水10 倍稀释，就可以用于蛋白电泳。如果需要电泳80KDa 以上的蛋白可以添加终浓度为0.1%的SDS。

储存：室温，有效期12个月。

名称：4%-20%梯度预制胶，12孔
货号：SY0371
规格：1盒（10块）
本品通过pH中性缓冲液制备，丙*酰胺与甲叉丙*酰胺配比是29：1，其规格为浓缩胶5%，分离胶4-20%，胶板尺寸10×8cm，凝胶厚度1 mm，12孔梳齿，单孔zuì大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液，蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad，天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。

蛋白电泳经常使用聚丙*酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙*酰胺单体和N,N-亚甲基双丙*酰胺（甲叉丙*酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比，使用预制胶具有以下优点：1）即开即用，不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固，节省了宝贵的时间和精力；2）不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂（丙*酰胺/甲叉丙*酰胺：神经毒性和遗传毒性；TEMED：强神经毒；过硫酸*：可严重损伤呼吸道，眼睛，皮肤）；3）大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。

使用方法
1）剪开包装取出胶，撕去胶板底端胶纸，将预制胶固定在电泳槽中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢（一定要慢，否则会将胶齿拔断或拔歪）拔出，在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡（通过加固前后板，不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙，还可稳定跑胶质量，电泳过程中“V”型卡不可取出），上样后进行电泳，电泳后取出胶板，用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开，将胶取出，弃去塑料板。
2）电泳：使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液（tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%），也可使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液（SY0360）。推荐使用低压100V，15min换高压150V跑至电泳结束。
3）转膜：使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液（含 20%*醇或乙醇），操作与实验室原有操作完全相同。也可以使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液（SY0360），无需添加*醇，无需冰浴，但是需要另行添加20%乙醇，恒压50V电转60 min。

储存条件：4℃，有效期一年。

注意事项
1) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如丙*酰胺和甲叉双丙*酰胺有毒，对人体有害，请注意适当防护。
3) 电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液，试剂纯度不够，反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ，因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸。
5) 拔掉梳子后，如果偶尔出现胶齿不直的情况，可用注射器针头将胶齿拨正。
6) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露，可通过两种方式解决本问题：一是内槽加满意缓冲液，外槽液面加至距内槽液面3-5mm，从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装，使其没有凸起的平滑面朝外，从而防止漏液。