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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输、4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
SDS-PAGE Stacking Gel Buffer
- 库存:
421
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应SDS-PAGE浓缩胶配胶液厂家价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:SDS-PAGE浓缩胶配胶液厂家价格
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:SDS-PAGE Stacking Gel Buffer
编号:BTN100867
本产品专门用于配制非联续SDS-PAGE胶的浓缩胶,其浓度为4×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
关于SDS-PAGE浓缩胶配胶液厂家价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·预染蛋白Marker(43~200kD)
编号:BTN70704B
英文名称:Prestained Protein Marker(43-200kD)
规格:10次
本产品为蛋白质电泳标准系列,是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物,在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准,粗略估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.提供干粉型或溶液型,即开即用,非常方便。
2.预染色,在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动,也可以监测转膜效果。
3.可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4.本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围,单次上样,每个条带的浓度约为0.2μg/μL。
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 预染蛋白标准(低分子量) | 20T | - |
| 预染蛋白标准(高分子量) | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、干粉型的使用
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2.低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟,短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后,直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
3.使用时每次取一管,低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟,然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B),但由于共价结合了染料分子,各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白,所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量,一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量,则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102),以避免误差。
本系列产品所含成分及分子量分布
| 分子量范围 | 低分子量 | 高分子量 | |
| 肌球蛋白重链 | 200kD | 有 | |
| *调素结合蛋白 | 130kD | 有 | |
| 兔磷酸化酶B | 97.4kD | 有 | 有 |
| 牛血清白蛋白 | 66.2kD | 有 | 有 |
| 兔肌动蛋白 | 43kD | 有 | 有 |
| 牛碳酸酐酶 | 31kD | 有 | |
| 人生长激素 | 22kD | 有 | |
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1kD | ||
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4kD | 有 | |
SDS-PAGE浓缩胶配胶液厂家价格关键词:SDS-PAGE Stacking Gel Buffer,BTN100867,SDS-PAGE浓缩胶配胶液
·Bouin固定液
编号:BTN130819
英文名称:Bouin Fixative Solution
规格:250mL
Bouin氏液是组织化学中最常用的混合型固定液之一,由苦味*(代"酸")饱和液(1.22%)、甲醛和冰醋酸按15:5:1的比例混合而成。此固定液对大多数组织固定效果良好。
产品特点:
1.其渗透能力强,固定均匀,组织收缩小,染色效果好。
2.适用范围广,特别适合于富含结缔组织的标本和胚胎标本。能够软化皮肤角质,并可以用于植物组织的固定。
3.因为本产品含有苦味*(代"酸"),会溶解火棉胶,所以如果用于火棉胶包埋,必须进行洗脱苦味*(代"酸")处理。
4.标本尺寸不可太大,一般窄边不大于5mm。
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:
1.标本修块,厚度一般不超过5mm,置入本产品内固定8~24h(根据样品材料、大小不同,固定时间可能会有较大差异)。
2.固定后用70%~80%乙醇洗涤。
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·农杆菌EHA105化学感受态细胞
编号:BTN140383
英文名称:E.coli EHA105 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
本产品为EHA105农杆菌化学感受态细胞,为C58型背景,核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件,pEHA105(pTiBo542DTDNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。本产品适用于水稻、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1ug(体积不大于10μl)质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌,保留100μl左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。
注:当平板只含有50μg/mL kan时,28℃培养48 h 即可;平板中同时加入50μg/mL kan、20μg/mL rif时,需28℃培养60 h;如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90h。
注意事项:
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/mL,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan,若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
我公司正在打折促销蛋白质研究全系列产品,恭候您的咨询选购SDS-PAGE浓缩胶配胶液厂家价格。
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文献和实验1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起
迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 Q:配胶缓冲液系统对电泳的影响? A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩
,还借用师兄师姐的二抗多次,一样是空白结果,所以排除一抗二抗的问题。3.配胶浓度问题:换了好几种分离胶浓度,仍无条带。4.孵育时间问题:一开始一抗过夜,二抗 2 小时孵育,最后改为一抗过夜,后再平遥一小时,二抗过夜,结果仍无条带。5.样本问题:将样本送到师兄和厂家那里能做出结果,师兄的样本借我后,仍做不出结果,排除样本问题。6.TBST 洗膜液浓度问题:借用师兄的洗膜液配置牛奶和洗膜,仍无条带。7.运气问题:为了驱赶不好的运气,菜鸟师姐和淑女师妹回家呆了半个多月,求神祈福,查找各种 Western
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