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341
- 英文名:
CollagenaseⅣ
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100mg
特别提示:包括胶原酶Ⅳ在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:胶原酶Ⅳ
英文名称:CollagenaseⅣ
产品货号:QN1616
产品规格:100mg
胶原酶Ⅳ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织胶原蛋白酶,来源于溶组织梭菌。
别名:梭菌肽酶A
CAS:9001-12-1
储存条件:-20℃
纯度:0.5-5.0 FALGPA units/mg solid,≥125 CDU/mg solid
外观:棕色或棕褐色结晶性粉末
胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。胶原酶的使用浓度一般为0.1- 5mg/ml,消化过程中可以搅拌以促进酶的消化。胶原酶在消化的过程中可以引起细胞的少量死亡,一般消化时间为15min至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首xuǎn的缓冲液为含钙离子和BSA的Krebs Ringer Buffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量,同时可以加入0.5%BSA或5-10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。胶原酶的灭菌首先离心或者用0.8µm的滤器去掉不溶物。然后再用0.2µm的滤器过滤除菌。盐酸苯甲脒和TLCK联合作用可以与该酶成分中大部分的蛋白酶结合而抑制其活性,但是他们却不会抑制胶原酶的活性。其中盐酸苯甲脒的浓度一般为1mM,TLCK的浓度一般为0.100-0.135 mM。值得注意的是两者不能完全保证所有蛋白酶的活性均被抑制。
酶的溶解性:0.05 - 0.1 mg/ml胶原酶溶于50 mM TES buffer,pH 7.4(37℃)含0.36 mM氯化钙。反应体系的终浓度为50 mM TES,0.36 mM氯化钙,25mg胶原,0.005-0.01 mg胶原酶。
酶液在含有0.3-0.5 mM钙离子的中性PH条件下可以在37℃维持活性15小时。在-20℃可以维持数月。
除了胶原酶Ⅳ,梭菌肽酶A,我公司还供应以下相关产品:
名称:L-乳酸脱氢酶
货号:YT539
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的L-乳酸脱氢酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化*酮酸与乳酸之间还原与氧化反应。
CAS:9001-60-9
酶促反应:(S)-lactate + NAD+ = pyruvate + NADH + H+
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
名称:己糖激酶
货号:JN0156
规格:10KU
外观:白色冻干粉末
来源:微生物
酶委员会编号:EC2.7.1.1
CAS#:9001-51-8
储存温度:-20℃
比活:≥500U/mg protein
活性定义:在PH8.0,温度为30℃ 的条件下,1unit每分钟可催化1μmol D-葡萄糖生成D-葡萄糖-6-磷酸。
分子量:55KDa(SDS-PAGE)
等电点:5.46
米氏常数:2.9×10-3M(Glucose)
zuì适pH:9.0
zuì适温度:30℃
pH 稳定性:50℃~55℃
温度稳定性:<37℃(PH8.0,30min)
抑制剂:Ag+,Hg2+
名称:胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚红)
货号:QN0477
规格:100ml|100ml*20
本消化液含0.25%胰酶和0.02%EDTA(0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。
别名:胰酶;胰蛋白酶
CAS号:9002-07-7
分子式:C6H15O12P3
分子量:24000
储存条件:-20℃,有效期12个月。
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
使用方法:
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定zuì佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
3.不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验问:有人提到一种酶缓冲液提供酶反应条件,酶蛋白即催化底物明胶,不知道是怎么回事情。我要测定活性和分泌。我知道是要使用聚丙烯酰胺凝胶电泳的,请教具体的实验方法很所需要的试剂。谢谢! 答:Type IV collagenase, 72-kD, is officially designated matrix metalloproteinase-2 (MMP2). It is also known as gelatinase, 72-kD. Type IV collagenase
丁香园网友yuanjianmei的问题为:胶原酶2一定要用D-hank's液配制吗?消化血管细胞一次要用多少啊?丁香园网友张艳红的观点为:用D-hank's液配制也可,但不一定。我做的是软骨细胞的原代培养,用的是1640完全培养基配制的。你消化血管细胞如果是做原代培养,我估计用6-8ml就可。我用时每次用8-10ml。当然,这也得视取用的组织特性和组织的量而定。仅供参考。丁香园网友wwj_5265994的观点为:不一定,我用PBS配的,我做的也是软骨细胞原代培养,用PBS配的,消化效果很好
Ⅳ型超敏反应机制 经典的迟发型超敏反应可由结核杆菌皮内注射而诱发。如果宿主曾经接触过结核杆菌,就会在24-72h后出现一个由T细胞介导的局部炎症反应。抗原接种大约4h之后,中性粒细胞在注射部位开始迅速聚集,血管内皮细胞也显示出一系列的形态和功能变化,包括生物合成的增加,细胞器合成的加速,并且发生血浆大分子的渗漏。血纤蛋白原(hbrin。gen)从血液渗透进入周围组织。纤维沉积和部分T细胞及单核细胞聚集,使注射部位的血管外组织形成肿胀和硬结。作为DTH的一个
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