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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 英文名：
超螺旋 DNA 分子量标准
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100uL
服务流程：
1）超螺旋 DNA 分子量标准100uL费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 超螺旋 DNA 分子量标准100uL费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 超螺旋 DNA 分子量标准100uL费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
通关藤苷F Tenacissoside F 928151-78-4 库存 15
通关藤苷I Tenacissoside I 191729-44-9 库存 16
土槿皮乙酸 Pseudolaric Acid B 82508-31-4 库存 17
土木香内酯 Alantolactone 546-43-0 库存 18
蜕皮激素 Ecdysterone 5289-74-7 库存 19
丹参素 Danshensu 22681-72-7 库存 20
丹参素钠 Sodium Danshensu 67920-52-9 库存 21
丹参酮I Tanshinone I 568-73-0 库存 22
丹参酮IIA Tanshinone IIA 568-72-9 库存 23
丹参新酮 Miltirone 27210-57-7 库存 24
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扁桃体 库存15
升主动脉 库存15
腹主动脉 库存15
胸主动脉 库存15
胃上动脉 库存15
膜粘连蛋白A3抗体 Anti-Annexin A3 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
膜粘连蛋白 A4抗体 Anti-Annexin IV WB IHC-P IHC-F IF 100ul
自噬相关蛋白8A抗体 Anti-APG8A WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 Anti-phospho-AMPK alpha-1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化蛋白激酶B抗体 Anti-phospho-Akt WB IHC-P IHC-F IF 100ul
超螺旋 DNA 分子量标准100uL费用单核细胞趋化诱导蛋白1抗体 Anti-MCPIP1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
肌球蛋白重链抗体 Anti-Myosin heavy chain 1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
基质金属蛋白酶28抗体 Anti-MMP-28 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
基质金属蛋白酶23抗体 Anti-MMP-23 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
MYC诱导线粒体蛋白抗体 Anti-Mimitin WB IHC-P IHC-F IF 100ul
实验步骤：
(1) 超螺旋 DNA 分子量标准100uL费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验佚名 双螺旋DNA进一步扭曲盘绕则形成其三级结构，超螺旋是DNA三级结构的主要形式。自从1965年Vinograd等人发现多瘤病毒的环形DNA的超螺旋以来，现已知道绝大多数原核生物都是共价封闭环(covalently closed circle,CCC)分子，这种双螺旋环状分子再度螺旋化成为超螺旋结构(superhelix或supercoil)，如图15-11
E.coli 的 DNA 的总长度是其细胞长度的 100 倍，那么它的 DNA 怎样包装成类核（ mucleoid ）呢？原来其 DNA 存在着超螺旋。 1963 年 Jevome Vinogred 在离心分离多瘤病毒（ polyoma virus ）的环状 DNA 时，原以为在离心管中只会出现一条带，结果出现了两条带，他认为一条可能是松驰型 DNA ，另一条可能是超螺旋 DNA ，从而发现了 DNA 的超螺旋。双螺旋进一步卷曲就会形成三级结构——
沉淀超螺旋质粒 DNA 的浓度为 2.0 g/L，由 NaCl 对不同沉淀的溶解能力，确定溶解沉淀的最优盐浓度为 0.75 mol/L. 用此方法得到的超螺旋质粒 DNA 的纯度达 90% 以上，收率为 78.94%. RNA、蛋白质残量以及内毒素均符合药品质量标准要求. CTAB 对质粒 DNA 的沉淀效果与质粒 DNA 的初始浓度有关，并且超螺旋质粒 DNA 浓度的降低与 CTAB 的添加量呈一定的线性关系. 超螺旋质粒的分子量 越小越不易被分离，并且结构特性比分子量在分离过程中更据主导
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