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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human CDC42 / G25K Protein (GST Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
100 µg
蛋白名称:Human CDC42 / G25K Protein (GST Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the mature form of human CDC42 isoform 2 (P60953-2) (Met 1-Cys 188) was fused with the GST tag at the N-terminus.
表达宿主:E. coli
蛋白纯度:> 85 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:Please contact us for more information.
预测N端:Met
蛋白分子量:The recombinant human CDC42/GST chimera consists of 423 amino acids and has a predicted molecular mass of 48.1 kDa. It migrates as an approxiamtely 44 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:P60953-2
蛋白氨基酸序列:Met1-Cys188
蛋白标签:N-GST
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验GST fusion protein purification--GST融合蛋白纯化
GST fusion protein purification GST融合蛋白纯化John Mundy,Institute of Molecular Biology,Copenhagen,Denmark1)grow 20ml cells O/N37℃ dilute 50X into prewarmed LB,grow to 0.6 OD or about1hr.Induce w/ 2mM IPTG (238mg/0.5l),grow 3hr,spin 6k GS3 10',freeze
细胞。置于冰上,用5-7× 沉淀物体积的裂解缓冲液重悬细胞(参见小规模测试的配方,含蛋白酶抑制剂和溶菌酶)。冰上孵育30 min。 6) 个样品超声处理15 s,3次,直到黏度降低。确保裂解物温度不超过10 °C。留下 10 μl为样品。 7) 40,000× g, 4 °C离心30 min,沉淀蛋白。上清和沉淀留取样品。 8) 根据小规模诱导估计的GST蛋白量和纯化情况,以及谷胱甘肽琼脂糖吸附珠的吸附量(按照说明),加入适量珠子。为确保纯度,加入的蛋白应多于
原理 GST 纯化系统是利用GST (glutathione-S-transferase )融合蛋白与固定的谷胱甘肽(GSH)通过硫键共价亲和,通过GSH交换洗脱的原理来进行纯化 。1ml树脂大约可结合5-8 mg融合蛋白,并可反复使用数次。试剂u IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷) 2g IPTG 溶解入10ml 水,过滤除菌,分装,-20℃保存。u Lysis buffer (50ml)1)2.5ml 1 M Tris,pH8.0 2)0.1ml 0.5ml EDTA 3)0.292
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