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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
175
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50μg
特别提示:包括蛋白内切酶 AspN在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:蛋白内切酶 AspN
产品货号:SV1563
产品规格:50μg
特性:
通过质谱进行蛋白质组学分析的理想用酶
无蛋白酶污染
zuì适用于多肽的鉴定
概述:
蛋白内切酶 AspN(flavastacin)是锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸残基的 N-端肽键。
来源:
纯化自脑膜脓毒性黄杆菌(Flavobacterium menigosepticum)。
反应条件:
1X AspN 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 37℃),2.5 mM ZnSO4],37℃ 温育。
随酶提供的试剂:
2X AspN 反应缓冲液。
比活力:
~25 μmol/min/mg。
分子量:
~25 μmol/min/mg。
质量保证:
蛋白内切酶 AspN 不含甘油和去污剂,因此避免了这些物质对基质辅助激光解吸/离子飞行时间质谱(MALDI-TOF)、电喷雾电离(ESI)质谱(MS)或液相色谱(LC)可能产生的干扰。
重溶:
蛋白内切酶 AspN 应使用 50-500 μl 的高纯水溶解,快速自裂解效率随酶浓度:不同而异。
注意事项:
以液态形式于 -20℃ 可贮存 2 周,但液态形式保存会降低活性。为达到zuì佳效果,请使用新鲜重溶的蛋白酶。
AspN 只推荐用于多肽的切割,对蛋白的切割效率明显降低。
除了蛋白内切酶 AspN,,我公司还供应以下相关产品:
名称:核酸外切酶T
货号:BTN130627
规格:250U
核酸外切酶T(Exo T)又称核糖核酸酶T(RNase T),沿 3′→5′方向特异性作用于单链RNA或DNA的3′突出末端。核酸外切酶T作用于3′突出末端,产生RNA或DNA分子的平末端。
产品特点:
?特异地作用于单链DNA或RNA;
? 使DNA或RNA的3′突出端变为平齐末端;
? 无核酸内切酶和外切酶污染。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 核酸外切酶(5000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
热失活:65℃ 加热 20分钟。
活性定义:1单位指 100μl反应体系中,25℃条件下,30分钟从1nmol[3H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成0.1nmol TCA可溶性DNA所需要的酶量。
名称:KpnI限制性内切酶
货号:SV0447
规格:20KU|20KU|4KU|2KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 50%
特性:
重组酶。
反应条件:
BalbBuffer 1.1,37℃。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
Kpnl是Acc65l的不完全同裂酶。Kpnl 产生一个 4 碱基的 3´突出端,而 Acc65l 产生一个 4 碱基的 5´突出端。
如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度:或甘油浓度:>5%。
名称:PmlI限制性内切酶
货号:SV0598
规格:10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:Nb.BsmI切刻内切酶
货号:SV0807
规格:5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 10%
特性:
重组酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1,65℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性:
25%。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
建议反应时间不超过 4 小时。
名称:热敏磷酸酶(AP)
货号:SV1063
规格:5KU|1KU|500U
特性:
DNA 和 RNA 的去磷酸化
防止克隆载体的自连
制备 5´ 末端标记模板
去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
概述:
热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。
来源:
克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因zuì初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。
反应条件:
1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-*烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2(pH 6.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 5 分钟。
质保声明:
热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟能使 1 μg 经 HindIII(产生 5´ 突出末端)、EcoRV(产生平齐末端)或 PstI(产生 5´ 凹陷末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。
浓度:
5,000 units/ml。
名称:Klenow大片段
货号:JN0070
规格:150U×5
本酶是大肠杆菌DNA聚合酶I经基因工程改造的产物。由于基因重组,其不含有DNA聚合酶I的5´→3´外切核酸酶活性,只具有5´→3´的DNA聚合酶活性和3´→5´的外切核酸酶活性。其中3´→5´的外切核酸酶 的活性较弱,不适用于3´突出端的切平。本品浓度为5U/ul。
产品用途:
1、双脱氧法DNA序列测定。 (Sanger法)
2、突出端的补平。(参见实验方案)
3、使用随机引物进行DNA标记。
活性定义:
在37℃条件下,30分钟内能使10 nmol 的dNTPs渗入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
热失活:75℃,20分钟。
名称:RNase A(无DNase和蛋白酶活性)
货号:MT0091
规格:1mL|5mL
RNase A是一种核糖核酸内切酶,可特异性降解单链RNA的C及U残基部位。它可以剪切核苷酸5"-核糖与相邻的嘧啶核苷酸3"-核糖上所连磷酸基团间的磷酸二酯键,获得的2", 3"-环状磷酸盐可进一步水解为相应的3"-核苷磷酸。该酶的浓度为20mg/ml,活力约1500U/ml。
保存条件:-20℃,可保存3年,该酶室温也极其稳定。
单位定义:一个单位定义为在25℃、pH 5.0的条件下,催化水解RNA的一级反应速度常数为1.0时的RNase A量。
使用注意事项:
1.该酶对温度不敏感,但zuì佳反应温度为37℃。
2.该酶可在含有SDS的条件下发挥活性。
3.通常去除基因组DNA中的RNA污染的使用比例为1:200~1000。
4.使用前无需再加热处理。
核酸酶选择指南:
| 货号 | 酶 | 消化活性 | 底物 | 产物 | 用途 |
| MT0068 | Benzonase核酸酶 | 核酸内切酶活性 | 任何形式的DNA/RNA | 3-5bp寡核苷酸 | 消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。 |
| MT0084 | T5核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | dNMP至6寡核聚体 | DNA消化和Gibson组装 |
| MT0085 | T7核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 双链DNA | ssDNA和二核苷酸 | 消化双链DNA |
| MT0086 | λ核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | ssDNA和dNMP | 消化双链DNA |
| MT0087 | 核酸外切酶I | 3"-5"单链外切酶活性 | 单链DNA | dNMP、二核苷 | PCR扩增后降解消化引物 |
| MT0088 | 热敏双链DNA核酸酶) | 双链DNA核酸酶活性 | 双链DNA | 2-8bp寡核苷酸 | 去除RNA样品中的DNA污染。 |
| MT0089 | Rnase H | 核糖核酸内切酶活性 | 杂交到DNA链上的RNA | ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸 |
除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。 |
| MT0090 | Dnase I | 核酸内切酶活性 | 单链和双链DNA | 2-3bp寡核苷酸 | 蛋白样品中DNA的去除 |
| MT0091 | Rnase A | 核酸内切酶活性 | 单链RNA | 3"-核苷磷酸 | 质粒或基因组中RNA污染的去除 |
| MT0092 | DNA损伤修复酶 | 核酸外切酶活性 | DNA | DNA修复 |
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文献和实验Alphabetic List of Commercial Isoschizomers and Corresponding Fermentas Restriction Endonucleases Information on commercially available restriction endonucleases is from: Roberts, R.J. and Macelis, D., Nucleic Acids Res
工作仍在继续。人们从分析细胞提取物的生化角度研究的同时,也采用计算机分析已知的基因组数据,以期有更多的发现。尽管很多新发现的酶的识别序列与已有的重复--即同裂酶,仍然有识别新位点的酶不断被发现。 上世纪80年代,NEB开始克隆并表达限制性内切酶。克隆技术由于将限制性内切酶的表达与原有细胞环境分离开来,避免了原细胞中其它内切酶的污染,从而提高了酶的纯度。此外,克隆技术提高了限制性内切酶的产量,简化了纯化过程,使得生产成本显著降低;克隆的基因很容易进行测序分析,表达出的蛋白也能进行X射线
相关专题 重组DNA技术工具酶 限制性核酸内切酶产品选择专题 实验目的 1. 学会DNA限制性内切酶 酶切技术。 2. 琼脂 糖凝胶电泳法观察酶切DNA的结果。 实验原理 质粒pUC118上有限制性内切酶BamHI的识别序列G↓GATCC,用BamHI酶切后形成线性质粒DNA。琼脂 糖凝胶电泳可以按酶切产物分子量的大小分离DNA片段,小片段比大片段迁移快,凝胶上迁移的距离
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