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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0225
- 2025年11月21日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Blood DNAout
- 库存：
860
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是基于经典离心法的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。
血液DNAout具有下列特点：
1.DNA纯净，OD260/OD280在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA产量一般在30-50ug/mL全血。
2.操作简单，整个过程约15分钟，室温操作，适合大规模样品处理。
3.一次的血液处理量最多可达5mL，不需要柱子，不会发生其他同类产品经常发生的堵塞现象。
4.价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格只有其一半左右。
5.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
血液DNAout运输及保存：
运输及保存，有效期一年。
自备试剂：氯仿、、75%乙醇。
血液DNAout使用方法
1.在装有抗凝血液的离心管中，按1：1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2.5000-10000g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3.将沉淀重悬于1/2体积（按最初血液的体积计算）的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.小心弃去上清，沉淀即为去除了红细胞和白细胞胞浆的白细胞细胞核。
5.在白细胞细胞核中加入0.6mL溶液A（溶液A用前需要充分摇匀），用移液枪轻柔吹打混匀（剧烈吹打会打断DNA）。
6.68℃水浴10分钟（此步可省略，但产量略有降低）。
7.加入0.2mL氯仿和0.3mL溶液B，立即小心颠倒混匀。
8.室温13000-15000g离心3分钟，小心将上清（约0.7mL）转移至一新的1.5mL塑料离心管中。
9.加入等体积（自备），轻柔颠倒混匀5-8次，此时一般会出现絮状DNA沉淀。DNA可以用下列方法之一回收。
10.方法一：可以用枪头将絮状DNA挑出，放在1mL75%乙醇中几十秒使其中的盐离子进入乙醇中，然后再挑出DNA，在空气中放半分钟使乙醇挥发，再转移到0.1-0.3mL自备的TE缓冲液中溶解过夜（大分子的DNA需要长时间才能彻底溶解）。
11.方法二：室温13000-15000g离心1分钟，去尽上清。在DNA沉淀中加入75%乙醇，震荡后室温13000-15000g离心1分钟，去尽上清（含盐离子）。重复75%乙醇洗涤一次。短暂离心，去尽残留75%乙醇（此步十分重要，不要省略，否则乙醇会影响DNA的溶解和后续的使用），最后在DNA沉淀中加入0.1-0.3mL自备的TE缓冲液过夜溶解DNA待用。
血液DNAout疑难解答
Q:本产品是否可以用于放量操作?
A:可以在大的离心管中进行放量操作，如每次处理5-100mL血液，只是客户需要单独购买红细胞裂解液，并按比例增加溶液A和溶液B的用量。
血液DNAoutQ:冷冻血液为何DNA产量很低?
A:冷冻过程中形成的冰晶刺破了细胞膜和白细胞细胞核膜，红细胞裂解液处理时释放的DNA将进入上清并丢失，所以最后得到的DNA只是少数没有是被冰晶刺破的细胞的DNA。对冷冻血液，建议使用本公司的陈血DNAout或者在冷冻前直接将血液保存在血液DNAlocker中常温保存。
血液DNAoutQ:本产品血液DNAout得到的DNA含不含线粒体?
A:本产品用到的A型红细胞裂解液（单独的产品）裂解血液后得到是白细胞细胞核，所以不含。
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