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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0290
- 2025年11月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Glassbeads Large-Scale Column Fungal DNAout
- 库存：
860
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品在xuanya柱式真菌DNAout基础上改良而得的大提升级产品，主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。跟柱式真菌DNAout相比，它具有下列特点：
1.处理量大，一次可以处理1-3g各种真菌组织。
2.纯度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂，得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplexPCR、RAPD、RELP、AFLP、SouthernBlotting，microsatelliteanalysis等各种后续分子生物学实验。
3.采用玻璃珠法破碎细胞，属于物理方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外援真菌DNA（注：文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌DNA污染，用于提取真菌DNA往往会造成污染。这些文献可从本公司本产品介绍网页下方下载）。
4.产率一般在10-100ug/g真菌样品。离心吸附柱最大吸附量为800ug。
5.DNA片段长度一般在20-40kb左右。
6.适用范围广，适用于度大多数真菌材料，包括酵母（S.cerevisiae、S.pomb、Pichiapastoris）等。
Southern级真菌DNAout运输及保存：
常温运输,4℃保存，有效期一年。
自备试剂：无。
Southern级真菌DNAout使用方法
1.对菌液：取60-100mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中，12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2.对菌落：用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落（约1g），转移到装有20mL无菌水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3.对孢子材料，一般取1-3g左右，直接加入到离心管中，在材料中加入无菌水20mL，振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
4.沉淀中加入10mL溶液A和10克的玻璃珠，涡旋震荡10分钟，可以延长震荡时间。
5.加入10mL的溶液B，涡旋震荡5分钟，12000rpm离心2分钟，将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。
6.在上清中加入3倍体积的溶液C，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后均先室温放置2分钟，然后12000rpm离心1分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面的操作，直到挂柱步骤完成。
7.将20mL通用洗柱液加入离心柱，12000rpm离心1分钟，弃穿透液。
8.重复上步操作一次。
9.12000rpm空甩1分钟去除残留液体。
10.将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中，加入500uLDNA洗脱液2.0。
11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟，管底即为真菌DNA样品，吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上，离心洗脱以收集更多的DNA。
12.所得DNA可立即使用，也可长期保存在－20℃。
13.注：如离心机转速不能达到12000rpm，可以用最大转速离心10-15min代替12000rpm离心1-2min。
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