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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
壳聚糖磁珠
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
2mL

服务流程:
1)壳聚糖磁珠2mL品牌客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. 壳聚糖磁珠2mL品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 壳聚糖磁珠2mL品牌组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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EnterobacterSakazakiiIs
实验步骤:
(1) 壳聚糖磁珠2mL品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验,当其与混合细胞孵育后,磁性微粒表面抗体会与细胞表面的抗原决定簇发生抗原抗体的特异性反应,使得细胞被磁性复合微粒标记。在外加磁场的作用下,抗体与磁珠相连的细胞会因磁珠的磁性而滞留在磁场中,而不表达此抗原的细胞因不能与磁珠表面的特异性抗体结合而没有磁性,不能够在磁场中滞留,从而使目的细胞与非目的细胞分开,得到较高纯度的目的细胞。 图1 免疫磁性细胞分选原理示意图 2 磁性细胞分选分类 根据分选过程中所标记细胞类型的不同将免疫磁性细胞分选系统分为阳性分选、阴性分选和复合分选三种。 阳性
um),结合力强 直径小(1-4 um),动力学好 靶蛋白获取量高 表面光滑,beads 吸附很少,背景低,抗体消耗少 缺点 多孔易吸附(记得做 pre-clear) 需配备磁力架 其他 建议在 4 ℃孵育 4-6 h 或者过夜 依据不同品牌的磁珠类型,建议孵育时间 15 min-2 h 4、孵育(结合)顺序与孵育条件 抗体+裂解液,然后和加入 beads Beads+抗体,然后加入裂解液 Beads+抗体+裂解
stem cell公司MACS产品主要技术有以下几类:一、EasySep® 磁性正选或负选细胞,不需柱子;二、StemSep® 磁性正负分选,需要柱子;三、RosetteSep® 免疫梯度离心分选,不需磁极,不需柱子;四、SpinSep®负选产品 。以下一一介绍。一、EasySep®磁性正选或负选细胞,不需柱子用于正、负选人或其它种类动物的细胞EasySep® 是一种新型而高效的免疫磁珠细胞分选技术,具有单克隆抗体的特异性和无分离柱磁性系统的简便性。靶细胞表面特异性的抗原抗体反应为富集细胞提供
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