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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1次
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次规格详细介绍:

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次规格的相关产品:
小鼠白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA试剂盒
Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA试剂盒人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
重组逆转录病毒稳态表达细胞筛选试剂盒(HAT+潮霉素)10次(10毫升:10倍浓缩)
HumansolublehumanleucocyteaigenG1,sHLA-GELISAKit人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISA试剂盒规格:96T/48T
猪载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human erythropoiesis stimulating factor (ESF) ELISA Kit 人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒
Rabbitmaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforApl/APA(Humanai-phospholipidaibody)ELISAKit人抗磷脂抗体规格:48T/96T
血清/血浆总胆汁酸酶循环比色法定量检测试剂盒20次
Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit猪白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒规格:96T/48T
总蛋白定量测试盒(带标准;考马斯亮兰法) Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)
总蛋白定量测试盒(带标准;考马斯亮兰法) Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)
蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) Protein standard (total protein, albumin)
微量游离血红蛋白测试盒 ace free hemoglobin test case
MotilityTestMedium(Semisolid)
马铃薯-蔗糖培养基 Potato sucrose Medium 用于霉菌增菌培养
液体改良马丁培养基(含琼脂) Martin Broth,Modified(Flour) 250克 生物制品真菌无菌检验
Dubos肉汤基础250g/瓶用于结核杆菌的培养,每90ml培养基中需添加2支22ncubationmediaDubos肉汤基础250g/瓶用于结核杆菌的培养,每90ml培养基中需添加2支22111
M-EndoBroth
假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂 规格: 250g 用途: 用于饮用天然矿泉水检验中铜绿假单胞菌的测定。(GB/T 8538-2008)
金氏B培养基 规格: 250g 用途: 用于饮用天然矿泉水中铜绿假单胞菌产荧光特性的测定。(GB/T 8538-2008)
乙酰胺培养基 规格: 100g 用途: 用于革兰氏阴性非发酵菌特别是绿脓杆菌的选择性分离培养(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。
酶试剂 规格: 2mlX10 用途: 用于试验。
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次规格BM固体培养基250g用于醋酸钙不动杆菌增菌培养
28981 技术琼脂粉 BR 500g 培养基凝固剂,具有良好的透明度,凝胶强度,较低的凝固温度 incubation media 28981 技术琼脂粉 BR 500g 培养基凝固剂,具有良好的透明度,凝胶强度,较低的凝固温度
构巢曲霉 模式菌株 支/瓶
LB琼脂250用于基因工程菌大肠杆菌培养
氯霉素麦芽提取物琼脂培养基 250g 用于真菌的分离培养
操作步骤:
1. 一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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文献和实验采用Ostro 96孔样品制备板轻松提高DBS萃取物的洁净程度
%以上的PLs残留。Ostro 96孔板可通过使用96孔制备板的形式进一步简化DBS萃取流程,同时提取分析物、去除磷脂、过滤干血斑纸片。DBS样品可在孔内萃取并稀释直接进样到LC/MS/MS系统中。该创新方法能够显著降低样品制备时间,并在萃取转化、干燥、复溶过程中避免潜在的分析物流失。在本应用纪要中,我们同时应用了传统方法和Ostro 96孔样品制备板方法,对含有利培酮、利培酮羟基化代谢物、9-OH利培酮及其内标氯氮平(图1)的全血样品进行了萃取。 实验部分
2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒:MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒: MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout(动物DNA提取试剂盒):3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout(植物DNA提取试剂盒):3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒): 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒: 3673-10 10 次 90元
选择省时、省成本、省纯化工艺的操作流程。所有的操作都应该能够放大到每批生产克级甚至千克级的质粒。最重要的是,所有过程要有重复性,这样才能使生产出的质粒一直符合产品规格。一般的,质粒的大规模纯化包括下面几个或所有步骤:细胞裂解,沉淀,酶消化,柱层析(一步或多步),脱盐或着改变缓冲液,以及无菌过滤。质粒的大规模生产纯化的大致流程如下图所示[66]: 4.1 细胞收集 细胞培养结束后,必须通过连续流或者微过滤[67]对培养菌体进行浓缩,这不仅仅是要对菌体进行浓缩,而且是为了去除对接下来的纯化有影响
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