孔雀石绿ELISA定量检测试剂盒

一. 概要
孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体，又名碱性绿、盐基块绿、孔雀绿，其既是杀真菌剂，又是染料，易溶于水，溶液呈蓝绿色。长期以来，渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等，而且为了使鳞受损的鱼延长生命，在运输过程中和存放池内，也常使用孔雀石绿。研究显示，孔雀石绿在鱼体内残留时间长，且具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，鉴于此，许多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。我国于2002年5月也将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。目前检测孔雀石绿的方法有两种：HPLC或GC-MS，但是其前处理步骤繁琐，费用昂贵。本试剂盒采用竞争酶标免疫法，同时把隐性孔雀石绿氧化成孔雀石绿，可经济、快速地检测鱼、虾、以及鱼池或者鱼缸水样中总的孔雀石绿残留。
二. 测定原理
孔雀石绿酶联免疫检测试剂盒是利用免疫学竞争法的原理，固相载体微孔板上包被有孔雀石绿蛋白偶联物。检测时，加入待测孔雀石绿标准品或样品溶液，然后加入特异性的孔雀石绿的抗体一起孵育，溶液中的孔雀石绿跟板上包被的孔雀石绿蛋白偶联物竞争性地与孔雀石绿抗体结合，形成抗原抗体复合物。孵育一段时间后，洗板，加入羊抗鼠辣根过氧化物酶结合物；洗涤后加入显色剂，结合的酶将无色的显色剂转化为蓝色的产物；加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色；在450nm波长进行检测，样品中的孔雀石绿的浓度与吸收光强度成反比。
检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度：0.05ppb
样本最低检测限：
鱼/虾等水产品 ………………………0.5ppb 水样 …………………………………0.1 ppb
回收率：
水样/鱼/虾等水产品
孔雀石绿…………………65±15% 隐性孔雀石绿……………100±15%
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%