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- 提供商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 服务名称:
载体介导的RNAi服务
- 规格:
次
● shRNA设计:客户需要与我们共同讨论实验方案,并提供靶基因名称、序列或GeneBank ID等。
● shRNA合成
● shRNA载体的选择,万生昊天提供pGPU6/GFP/Neo、pGPH1/GFP/Neo等多种载体
● 根据客户要求可进一步转染哺乳动物细胞
● 检测抑制效果:荧光定量PCR检测mRNA表达情况、Western Blot检测蛋白表达情况
● 提供实验报告:shRNA序列、构建载体的测序报告;荧光定量PCR检测报告、Western Blot图片等。
TripleStrike 定制 shRNA 套餐
这个全包服务提供了针对一个基因三个不同区域的3种shRNA载体和两种对照shRNA载体的设计和构建。客户只需要提供给我们一个基因查询号(基因库ID)或基因序列,我们保证这个基因的沉默效果。
| 套餐包括设计与构建 | |
| 1.三种shRNA表达载体 | |
| shRNA载体数量 | 3 |
| 靶基因 | 客户指定 |
| 数量 | 20微克/克隆 |
| 纯度 | 转染级 |
| 2.阳性对照shRNA | |
| shRNA载体数量 | 1 |
| 靶基因 | GAPDH |
| 数量 | 20微克 |
| 纯度 | 转染级 |
| 客户提供:基因库ID(查询号)或者基因序列(客户也可以提供自己设计的三种shRNA序列) | |
| 保证三种shRNA中至少有一种会在mRNA水平产生 70%的沉默效果(对客户自己设计的不提供保证) | |
| 价格:询价 | |
| 交货周期:3-4周 | |
shRNA表达载体构建服务
| 服务代码 | 构建 | 时间 | 价格(¥) |
| Rsh-01 | shRNA载体的客户提供shRNA序列 | 3-4周 | 询价 |
| Rsh-01P | Rsh-01 +阳性对照shRNA载体(20微克) +阴性对照shRNA载体(20微克) +用于阳性对照的RT-PCR引物(0.5 OD) |
3-4周 | 询价 |
| Rm-01 | shRNA载体的客户提供miRNA序列 | 4-5周 | 询价 |
| Rm-01P | Rm-01 +阴性对照miRNA的载体(20微克) +用于阳性对照的RT PCT引物(0.5 OD) |
4-5周 | 询价 |
| ●阳性对照:GAPDH。 ●所有被交付的载体都是极度纯化并且易被转染的 ●我们提供免费设计服务。 |
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载体和插入选项
| 启动子 | H1或U6 |
| 报告基因 | GFP |
| 抗性 | 潮霉素或新霉素 |
| shRNA的插入 | ●25(stem)+4(loop)结构,25bp的目标位点 ●micro-30 miRNA |
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文献和实验非病毒载体介导的基因转移方法 1)DNA―磷酸钙共沉淀法:磷酸钙共沉淀法是由Graham等人于1973年首先建立的。最早用于将外源基因转入培养的单层细胞,其机制可能是Ca2+ -DNA结合物形成的颗粒沉积在培养的细胞表面,导致细胞非特异性内吞。转染效率取决于沉积反应和形成颗粒的大小,对于不同类型的细胞其转染效率有所不同,目前仅用于体外培养细胞的基因转移。 2)直接注射法:将裸DNA直接注入单个细胞或组织内,分为显微注射法和注射法。显微注射法DNA转移效率高,准确快速,但转染
.DescriptionThe RNAi-Ready pSIREN-DNR Donor Vector, a component in the BD Knockout™ Adenoviral System 2 (Cat. No. 631529), is designed to express a small interfering ds RNA (siRNA) driven by the human U6 promoter (P U6 ; RNA Pol III-dependent). RNAi-Ready pSIREN
.DescriptionThe RNAi-Ready pSIREN-DNR Donor Vector, a component in the BD Knockout™ Adenoviral System 2 (Cat. No. 631529), is designed to express a small interfering ds RNA (siRNA) driven by the human U6 promoter (PU6; RNA Pol III-dependent). RNAi-Ready pSIREN-DNR
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