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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100g
服务流程:
1)RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
非冻型细菌 RNA 保存液250mL 转 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次
非冻型拭子病毒保存液100mL 转 ESPES-NOs 基因植物 PCR Mix100 次
病毒沉淀剂100mL 转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次
水样病毒沉淀剂10 次 专用离心管 ( 配研磨杵用 ) 50 只
动物 RNAout(TRIzol) 100mL 专用离心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只
ATP 溶液,100mM0.25mL 第七章 蛋白质研究产品
ATP 溶液,2.5mM2mL 第六章 “克必隆”克隆及表达产品
UTP 溶液,100mM0.25mL 第二章 “天净沙”DNA纯化产品
UTP 溶液,2.5mM2mL 地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL
GTP 溶液,100mM0.25mL 低载量 PCR 片段纯化试剂盒50 次
单细胞全基因组扩增试剂盒30 次 动物 DNAout100mL
石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次 动态浊度法内毒素定量试剂盒1.7mL×10 支
单孢子全基因组扩增试剂盒30 次 动态显色法内毒素定量试剂盒48 次
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次 定影粉1袋
通用型 LAMP 试剂盒50 次 凋亡 DNAout24 次
TTC琼脂基础 英文名称; TTC Agar Base 规格; 250g
甘氨酸培养基 英文名称; Glycine Medium 规格; 250g
DNA酶甲基绿琼脂基础 英文名称; Dnase Agar Base with Methyl Green 规格; 100
布氏琼脂 英文名称; Brucella Agar 规格; 250g
马尿酸钠培养基 英文名称; 规格; 250g
精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS) Arginine Dextrose Agar 100
mCPC培养基 mCPC Medium 250g
mCPC培养基添加剂 mCPC Medium Supplement 1ml*5
副溶血性弧菌琼脂 Vibrio parahaemolyticus agar 250g
副溶血性弧菌增菌液 Vibrio parahaemolyticus Broth 250g
RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g说明书TGY琼脂 用于细菌的培养称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15min,备用。
胰化大豆坚固绿琼脂 用于滤膜法中细菌总数测定用途:用于滤膜法中细菌总数测定。成分(g/L)胰蛋白胨 15.0大豆胨 5.0氯化钠 5.0固绿FCF 0.25琼脂 15.0pH值7.3 ± 0.2 25℃用法称取本品 40.25g,加热溶 解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃ 高压灭菌 15 分钟,备用。规格:250g有效期: 三年
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌检验培养基
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) 用于大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB、SN标准)用途用于大肠菌群、大肠杆菌的测定。成分(g/L)胰蛋白胨 20.0g氯化钠 5.0g乳糖 5.0g磷酸氢二钾 2.75g磷酸二氢钾 2.75g月桂基钠 0.1gPH值 6.8±0.2用 法称取本品35.6克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。质量控制和典型特征在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其它细菌无气泡。
实验步骤:
(1) RNA 级 PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验还原剂法:一般在提取缓冲液中加入(-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)或半胱氨酸来防止酚类物质被氧化,有时提取液中(-巯基乙醇的浓度可高达2%。(-巯基乙醇等还可以打断多酚氧化酶的二硫键而使之失活。Su等认为在过夜沉淀RNA 时加入(-巯基乙醇(终浓度1%)可以防止在此过程中酚类化合物的氧化。硼氢化钠(NaBH4)是一种可还原醌的还原剂,用它处理后提取缓冲液的褐色可被消减,醌类化合物可被还原成多酚化合物。螯合剂法:螯合剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)中的CO-N=基有很强的结合多酚
试剂: RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)。由于在高温灭菌条件下,Tris-HCl要和DEPC发生反应,所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可。 SSTE:1 M NaCl,0.5% SDS(W/V),10 mM
液的褐色可被消减,醌类化合物可被还原成多酚化合物。 2、螯合剂法:螯合剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)中的CO-N=基有很强的结合多酚化合物的能力,其结合能力随着多酚化合物中芳环羟基数量的增加而加强。原花色素类物质中含有许多芳环上的羟基,因而可以与PVP或不溶性的PVPP形成稳定的复合物,使原花色素类物质不能成为多酚氧化酶的底物而被氧化,并可以在以后的抽提步骤中被除去。用PVP去除多酚时pH值是一个重要的影响因素,在pH8.0以上时PVP结合多酚的能力会迅速
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