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联硕生物
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100ml
多种成分均可从细胞中提取总蛋白,如Triton、SDS、NP-40等,RIPA裂解液(强) (Weak RIPA Lysis Buffer)是采用一种较温和的获得总蛋白的裂解方法,所获得的蛋白质可用于PAGE电泳、Western、免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
Weak RIPA Lysis Buffer主要由Tris、NP-40、sodium deoxycholate等组成,并含有多种蛋白酶抑制剂成分,可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g (1%)0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml (1%)Aprotinin
细胞凋亡是一种在基因控制下的细胞主动死亡过程,通常表现为核浓缩,起皱,膜发泡以及 DNA 片段化。WB 是研究细胞凋亡机理的基本方法之一,但是 WB 也不是谁都能做成功的,因为有可能你的第一步就做错了!用 WB 做细胞凋亡研究样品制备是第一步,样品制备方法至关重要否则会得到错误的结果和结论。样品制备,看你是不是这样做的:自配裂解液或者购买 RIPA,加上样品研磨啊研磨,孵育啊孵育,然后离心扔掉沉淀(RIPA 不可溶组分),取上清(RIPA 可溶组分)进行下游实验。对对对!都是这么做啊,扔
-40 1%;脱氧胆酸钠 5g/L;SDS 1g/L;PMSF 100mg/L;Leupeptin 2mg/L;钒酸钠 100μmol/L),冰浴条件...... (4)RIPA缓冲液(Tris-HCl 50mmol/L pH8.0;NaCl 150mmol/L;NP-40 1%;SDS 1g/L;0 5%DOC, EDTA 2mmol/L;PMSF 1mmol/L;Leupeptin 10umol/L;pepstatinA1umol/L;aprotinin 1ug/ml)裂解细胞,冰浴30min......
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