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文献和实验(1) 将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用。 (2) 配制琼脂糖凝胶。 ①称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml 锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。 ②待胶凉至60--70 ℃,依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5ul 溴化乙锭,混合均匀。 ③灌制琼脂糖凝胶。 (3) 样品准备: ① 取 DEPC处理过的500ul小离心管,依次加入如下试剂: 10x MOPS缓冲液2ul
:50%甘油,1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚蓝,0.4%二甲苯蓝。 (3)甲醛。 (4)去离子甲酰胺。v电泳槽清洗:去污剂洗干净(一般浸泡过夜)——水冲洗——乙醇干燥——3%H 2 O 2 灌满——室温放置10分钟——0.1%DEPC水冲洗。 操作: (1) 将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用。 (2) 配制琼脂糖凝胶。 ①称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml 锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加
。 2.制胶:称取0.5g琼脂糖粉末,加入放有36.5ml的DEPC水的锥形瓶中,加热使琼脂糖完全溶解。稍冷却后加入5ml的10x电泳缓冲液、8.5ml的甲醛。然后在胶槽中灌制凝胶,插好梳子,水平放置待凝固后使用。 3.加样:在一个洁净的小离心管中混合以下试剂:2μl 10×电泳缓冲液、3.5ml甲醛、10ml甲酰胺、3.5μl RNA样品。混匀,置60℃保温10min,冰上速冷。加入3μl的上样缓冲液混匀,取适量加样于凝胶点样孔内。同时点RNA标准样品。 4.电泳:打开
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