T4 RNA连接酶II（截短型)

特别提示：包括T4 RNA连接酶II（截短型)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：T4 RNA连接酶II（截短型)
英文名称：T4 RNA Ligase 2,Truncated
产品货号：WH0164
产品规格：500U

T4 RNA连接酶II（截短型）可特异性催化5"-P腺苷化的DNA或RNA与RNA的3"-OH连接。本产品不需ATP来发挥活性，但需要供体底物的5"-P腺苷化。通过对野生型蛋白的截短改造，使得本产品失去了对非腺苷化5"-P的DNA或RNA与RNA3"羟基的连接活性，因此，如果供体5"-P进行腺苷化修饰，那么应用本产品可特异性的将其连接到受体RNA的3"端，从而可zuì大限度的减少非目标连接产物的背景。本产品通过大肠杆菌重组表达。包含野生型蛋白的N端249个氨基酸残基，分子量约为30.5kDa。本制品浓度为5U/μl。

产品特点：
·特异的催化5"-P腺苷化的DNA或RNA与RNA 3"-OH的高效连接，背景更低；
·蛋白比活性高，稳定性好。

产品组成：

组成	WH0164
T4 RNA Ligase 2,Truncated	500U
10×T4 RNA Ligase 2,Truncated Buffer	1.5ml

储存条件：-25℃～-15℃保存。

贮存液成分：10mM Tris-HCl，100mM NaCl，0.1mM EDTA，0.1mM DTT，50%甘油。

适用范围：
1．在二代测序（ NGS ）应用中，主要用于miRNA文库构建中RNA的3"端接头的连接。
2．5"-P腺苷化的DNA或者RNA标签与任何种类RNA的3"端连接。

单位定义：
在1×T4 RNA Ligase 2,Truncated Buffer反应液中，20μl反应体系下，37℃，30min内使0.4μg等摩尔比的5"FAM标记的17nt单链RNA与5"腺苷化的18 nt单链DNA连接50%时，所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制：

性质	描述
蛋白纯度	＞99%
酶活性	30,000U/mg
单链核酸外切酶	50 U酶中，＜5.0%
双链核酸外切酶	50 U酶中，＜1.0%
双链核酸内切酶	50 U酶中，未检出
宿主基因组污染	50 U酶中，＜10拷贝
非特异性RNase残留	50 U酶中，未检出

使用方法：
在NGS文库构建过程中，一般按终浓度0.05~0.25 U/μl的量加入T4 RNA连接酶2（截短型）。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件：25℃，60 min。
灭活条件：65℃，20 min。

除了T4 RNA连接酶II（截短型),，我公司还供应以下相关产品：



名称：AciI限制性内切酶
货号：SV0011
规格：1KU|200U|100U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
Acil的识别位点是非回文序列。
因此在 DNA 被 Acil 切割并再连时，只有 50%的再 5´. . . C C G C . . . 3´ 连序列为 Acil的位点。

名称：EcoRI-HF限制性内切酶
货号：SV0349
规格：50KU|50KU|10KU|10KU|5KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。

名称：MslI限制性内切酶
货号：SV0495
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：PaeR7I限制性内切酶
货号：SV0581
规格：10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
PaeR7l 与 Xhol的识别序列一致。但实验证明，CTCTCGAG 序列不能被 PaeR7l 切割。

名称：ScaI-HF限制性内切酶
货号：SV0679
规格：5KU|5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：脱氧核糖核酸酶 I（无 RNase）
货号：SV1094
规格：5KU|1KU
特性:
转录反应后 DNA 模板的降解
除去 RNA 样品中污染的基因组 DNA
DNase I 印迹分析法
切刻翻译
概述:
DNase I（无 RNase）是一种非特异性核酸内切酶，切割 DNA 产生具有 3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA杂交链。
来源:
重组 E. coli 菌株，含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。
反应条件:
1X DNase I 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @ 25℃) ，2.5 mM MgCl2，0.5 mM CaCl2]，37℃ 温育。
热失活:75℃ 10 分钟。
质保声明:
无 RNase 污染。
单位定义:
1 单位指 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，10 分钟完全分解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
完全降解是指大多数的 DNA 片段降解成为四核苷酸或更短的核苷酸。
浓度:
2,000 units/ml。
注意事项:
为避免酶失活过程中 RNA 被降解应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA。