溶壁酶（10U/μl)

内参照定量PCR

聚合酶等 操作方法 1. 以标准方法从细胞株中分离总RNA；以适当的转录系统合成AW108cRNA，cRNA产物经oligo(dT)柱纯化，测其260nmOD值，并计算含量； 2. 用10μl逆转录反应系统，加入1μg细胞总RNA，1.77×102 ～1.77×107 个分子的AW108 RNA，1×PCR缓冲液，1mmol/L DTT，0.5mmol/L 4种dNTP，10U RNA酶抑制剂，0.1μg 0ligo(dT)引物，1μl MMLV逆转录酶。于37℃保温60

cDNA Synthesis from MOLT-4 Cells

the contents of the tube by brief centrifugation. 3. Add the following component : 4 μl 5X first strand buffer 2 μl 0.1 M DTT 1 μl 10 mMdNTP 1μl {a-32P}dCTP(1uCi/ul, 800 uc /mmol) mix by tapping the tube with a finger, and briefly spin it to collect

干货：外泌体的细胞摄取实验报告

液，用 PBS 清洗细胞 3 次 使用 4% 多聚甲醛在室温下固定 15 min 后观察细胞形态 弃去 4% 多聚甲醛，用 PBS 清洗细胞 3 次，每次 5 min （不透化）加入 1% Triton X-100 透化 5 min 后用 PBS 清洗细胞 3 次 配制所需染色工作液体积 加入 300μL 色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞 37℃ 避光孵育细胞 30 min。 吸除染色工作液，再用 PBS 洗涤 3 次，每次 5 min 取出细胞爬片，用含 DAPI 封片剂进行封片 激光