凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次说明书

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服务流程：
1）凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
miRNA 电泳分子量标准30 次  鸟类种属鉴定 PCR Mix100 次
微量 RNA 助沉剂0.1mL  尼龙膜，13×20cm1张
微量 DNA 助沉剂0.1mL  内皮细胞生长因子5mL
DNA 级 Acryl 助沉剂1mL  内毒素清除专用亲和介质5mL
彩色 Acryl 助沉剂1g  内毒素清除专用亲和介质50mL
液相内毒素清除剂500 次  通用型 RT-LAMP 试剂盒50 次
固相内毒素清除剂100g  通用型 LAMP 试剂盒50 次
固相内毒素清除剂500g  通用 miRNA 克隆接头0.83nmol
柱式内毒素清除剂1.5mL  填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次
内毒素清除专用亲和介质5mL  填入法 DNA 末端标记试剂盒 B5次
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次  接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
DNA 5’末端标记试剂盒10 次  接头 DNA(pSma I)5nmol
dNTP 溶液 ( 标记专用 )0.5mL  接头 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
生物素标记 dUTP 溶液50μL  接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol
Aminoally-dUTP 溶液，10mM100μL  接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
Elek氏培养基  英文名称；  Elek Medium  规格；  250g
大肠菌群快检纸片(水源水)  英文名称；  Coliform bacteria detective plate  规格；  5份/包
MFC肉汤  英文名称；  MFC Broth  规格；  250g
MFC琼脂  英文名称；  MFC Agar  规格；  250g
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）  英文名称；  Brilliant Green Lactose Bile Broth  规格；  250g
沙门氏菌、志贺氏菌检验培养基   
胆硫乳琼脂（DHL）  Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar  250g
SS琼脂  Salmonella Shigella Agar  250g
亚利桑那菌琼脂（SA）  Salmonella Arizona Agar  100
氯化镁孔雀绿肉汤（MM）  Rappaport-Vassiliadis Medium  250g
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次说明书氯霉素溶液（20mg）  每支添加于200ml氯硝胺18%甘油（DG18）琼脂中每支添加于200ml氯硝胺18%甘油（DG18）琼脂中
LG培养基  用于霉菌、酵母菌、耐热霉菌及细菌总数的检测，可用于PET瓶及无菌罐装生产线的无菌验证。用途：用于霉菌、酵母菌、耐热霉菌及细菌总数的检测，可用于PET瓶及无菌罐装生产线的无菌验证。成分：胰蛋白胨 、葡萄糖、酵母浸粉、铵、磷酸二氢钾、镁使用方法 ：称取本品29.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管或三角瓶，121℃ 灭菌15min。质量控制 ：配成的LG培养基为透明液体，质控菌株接种后于28～32℃ 培养3~5天，结果如下：贮 存 ：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
菌种培养基  用于四环素检定中蜡样芽孢杆菌的培养(SN标准)用于四环素检定中蜡样芽孢杆菌的培养(SN标准)产品用法：称取本品31.5克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟备用。
四环素检定琼脂  用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)产品用法：称取本品24.5克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。
实验步骤：
(1) 凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)