柱式昆虫 RNAout50 次说明书

实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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柱式昆虫 RNAout50 次说明书详细介绍：

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是柱式昆虫 RNAout50 次说明书的相关产品：
Denhardt 溶液，50×100mL  甲酰胺，PCR 级5mL
鲑鱼精 DNA 溶液1mL  加 T 试剂盒50 次
鲱鱼精 DNA 溶液1mL  加 A 试剂盒50 次
小牛胸腺 DNA 溶液1mL  即用型长片段 PCR 试剂盒20 次
荧光尺1个  即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒50 次
RNA 级 CTAB ( 十六烷基基溴化铵 )100g  脂蛋白纯化试剂盒50 次
RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g  支气管上皮细胞生长因子5mL
RNA 级 EDTA·2Na ( 四乙酸二 )100g  支气道上皮细胞生长因子5mL
RNA 级 Guanidium HCl ( 盐酸胍 )100g  真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次  大鼠内皮细胞分离液 1.066200mL
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次  大鼠淋巴细胞分离液 1.083200mL
草杆菌 PCR Mix 4100 次  大鼠粒细胞分离液 1.119200mL
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次  大鼠单核细胞分离液 1.082200mL
链霉菌 PCR Mix 6100 次  大鼠白细胞分离液 1.084200mL
新生霉素  英文名称；  Novobiocin  规格；  4.5mg/支*5
含225ml LB1肉汤均质袋  英文名称；  LB1 Broth  规格；  10个/包
萘啶酮酸（5.0mg）  英文名称；  Nalidixic Acid  规格；  5.0mg/支*5
含225ml FB1增菌液均质袋  英文名称；  FB1 Broth  规格；  10个/包
FB1(Half-Fraser)添加剂(A、B)  英文名称；  FB1 additive(A、B)  规格；  2ml/支*40
伊红美蓝琼脂(EMB)  Eosin-Methylene Blue Agar  250g
MH肉汤（MHB）  Mueller-Hinton Broth  250g
MH琼脂（MHA）  Mueller-Hinton Agar  250g
中国蓝琼脂  China Blue Agar  250g
克氏双糖铁琼脂  Kligler Iron Agar  250g
柱式昆虫 RNAout50 次说明书脱纤维羊血  每50ml脱纤维羊血添加于1000ml哥伦比亚血琼脂基础中与培养基配套使用，每50ml脱纤维羊血添加于1000ml哥伦比亚血琼脂基础中
改良Skirrow琼脂添加剂  每支添加于100ml改良Skirrow氏肉汤中每支添加于100ml改良Skirrow氏肉汤中
FBP溶液  每支添加于100ml与培养基配套使用，每支添加于100ml HB0242中
氧化酶试纸片  用于空肠弯曲菌氧化酶试验用于空肠弯曲菌氧化酶试验，需冷藏
操作步骤:
1. 柱式昆虫 RNAout50 次说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。