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- 2025年07月12日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
58
- 英文名：
Leucocytozoon spp.PCR
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
详见说明书
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| 产品名称 | 住白细胞原虫属通用PCR检测试剂盒费用 |
| 英文名称 | Leucocytozoon spp.PCR |
| 编号 | FS-R1736 |
住白细胞原虫属通用PCR检测试剂盒费用清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀释液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
产品说明书 1份
注意事项
1．住白细胞原虫属通用PCR检测试剂盒费用基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
反应五要素
住白细胞原虫属通用PCR检测试剂盒费用参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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技术特点：
1住白细胞原虫属通用PCR检测试剂盒费用准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果一致性大于99%。
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4简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。
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文献和实验个变异区，保守区和可变区互相交错排列，不同细菌都有不同程度的差异，可设计不同引物对所有细菌或特定细菌进行PCR检测[4]。利用PCR技术扩增16SrRNA基因，可早期判断是否存在细菌感染，进—步分析扩增产物鉴定病原菌的种属，弥补了细菌培养和血清学检测的不足。目前主要是将两条引物设计在16SrRNA基因保守区成为通用引物，首先确定是否存在感染，然后在中间的特异区中选择序列做探针进一步鉴定细菌[4,5]，除了需PCR扩增外，还要进行探针杂交，较为复杂且费用高。李雷等[6]采用细菌16SrRNA基因通用
探针在一些有条件的单位，作为主要的标记方法仍在使用。 放射性同位素标记技术也存在以下缺点： ①半衰期短，必须经常标记探针：如32 P、半衰期只有14.3天，放射强度逐日变化。35 S的半衰期可达88天，但衰变能量只有32 P的1/10，灵敏度较低，只能用于多拷贝基因的检测。3 H的半衰期虽长达12.26年，但衰变能低，灵敏度太低。 ②费用高：α-32 P标记的dATP（400Ci/mmol），需要进口试剂，价格高。 ③检测时间长：用放射自显影需要
从化学和生物学的意义上理解，探针是一种已知特异性的分子，它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原 - 抗体、血凝素 - 碳水化合物、亲合素 - 生物素、受体和配体，以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交，形成杂交体，再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断，称为分子杂交基因诊断。此法开始用于遗传性疾病的诊断如血红蛋白病的诊断、先天性遗传病的产前诊断。近来，已发展为诊断外源性病原体如病毒、细菌、原虫等的方法；内源
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