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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Branchiomyce spp.PCR
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
点击了解更多PCR检测试剂盒。
| 产品名称 | 鳃霉属通用PCR检测试剂盒图片 |
| 英文名称 | Branchiomyce spp.PCR |
| 编号 | FS-R1211 |
鳃霉属通用PCR检测试剂盒图片清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
注意事项
1.鳃霉属通用PCR检测试剂盒图片基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素
鳃霉属通用PCR检测试剂盒图片参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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技术特点:
1鳃霉属通用PCR检测试剂盒图片准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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文献和实验不过科研人员就没那么好运了,科研中需要用到定量PCR检测的目标广泛,不容易找到带有探针的定量检测试剂盒。当然,针对这种现状,几个大公司陆续推出探针库,比如罗氏的UPL通用探针库,就可以通过组合定量检测出人、大小鼠等7个物种的大部分ORF序列,特别适合大型实验室;ABI公司现在可以根据用户的需要提供约十二万种基因表达引物、探针和两百多万种SNP分析的引物探针进行科学研究,据说是源自于世界各地研究人员要求定制探针或者引物后汇总的结果,可惜就是贵,就连美国的实验室教授
实验室检测和快速诊断的标准如《GB/T 19438.1-2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.3-2004 H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》等。以上实时荧光定量PCR技术在禽流感检测方面的国家标准是该技术在当前的人感染猪流感诊断中应用的基础和前提。实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用要求实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative
erik 哪地方有卖的?想买点试试! lin123heng 我已经试用过EDU试剂了,做的是细胞爬片。因为流式要激发光550nm,我们实验室只有488nm。我用的是国产试剂,说明书写的一塌糊涂,最后我不得不自己完全改一个protocol.结果并不是很理想,因为我们照相机红色荧光不是很敏感,图片,没有上面的那么好。如果要我再选一次,我宁愿用PI或者是Brdu做流式。我买的试剂盒是1200元/20次。六孔板做的。 希望有兴趣的战友们实验前先看一看自己实验
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