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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1
- 组织来源:
ATCC/DSMZ
- 物种来源:
见www.yajimall.com
- 细胞形态:
见www.yajimall.com
- 运输方式:
复苏or冷冻管
- 生长状态:
见www.yajimall.com
- 规格:
T25瓶
产品规格:T25/1*10^6
培养条件:详见我司:www.yajimall.com
传代方法:消化3-5分钟。1:2传代,3天内可长满。
培养体系:温度37℃ ,气相 95%空气 ,5%CO2
细胞描述:本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。
冻存条件:无血清细胞冻存液
SK-N-BE(2)SK-N-BE(2)收到后处理:
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
SK-N-BE(2)SK-N-BE(2)细胞培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法三:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入到冻存液中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
SK-N-BE(2)SK-N-BE(2)售后服务告知书
1)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;
5. 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;
6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。
二)细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
1. 客户造成细胞污染,不重发;
2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;
6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;
7. 视具体情况而定。
注:由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素的影响,本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后是需收到细胞期间间隔时间不能大于7天,支原体污染问题最好是收到即测,支原体售后不能大于3天。
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文献和实验研究人员的论文发表之路往往很难一帆风顺,也就是说,通常情况下,很少有论文一经投稿、审稿就直接被录用发表。 一般来说,在审稿后收到「小修(minor revision)」的修改意见,已经可谓是十分令人兴奋、皆大欢喜的情况了,论文已在很大程度上接近了被录用发表。然而,更多时候,稿件在经历同行评审之后,可能会连同大量的修改意见一起被返回给作者修改,也就是「大修(major revision)」,这意味着稿件难免要面临一番大动干戈、脱胎换骨的修改,即便如此,依然不能保证修改后的稿件能被顺利录用发表
1. Inoculate the entire colony in 5 ml YPD culture O.N. or 12 hours 2. Dilute into YPA medium (1% yeast extract, 2% Bacto-peptone, 2%KOAC) to OD600~ 0.2, Vigorous shaking. 3. For ts mutants, ~15hours at 23C, others ~10 hours at 30C
信息量巨大的 Heatmap(热图)在 CNS 中受到热捧,正如名字一样越来越热了。无论你是各种组学的结果还是常见的数据,文章中不出现个热图你都不好意思叫 SCI 了!Heatmap 最大优点就是信息量大却一目了然。你会惊奇地发现,本来看似杂乱无章高高低低变化的数据做成热图后竟然一下子就简单了。传说是因为人眼可以选择性忽略一些噪音而抓住重点。听着挺有道理哈,可谁知道是不是真的呢;但文章里如果放个热图,顿时逼格确实提升了不少!我对这样的文章的景仰, 犹如长江之水滔滔不绝,又如黄河泛滥一发
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