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不限
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耗材
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现货
- 供应商:
广州科适特科学仪器有限公司
- 规格:
19470
适于荧光封片。由于生物样品的多样性以及免疫荧光组化中荧光衰退的复杂性,并没有一个完全通用的抗荧光衰退剂,常见的抗荧光衰退剂有AF1、AF2、AF3、AF87,其中AF87是一个唯一的油性抗荧光衰退剂。
AF1:用于检测经常浸泡于甘油中组织切片,它的基本成分是甘油、磷酸盐缓冲液等;
AF2:基本成分是甘油;
AF3:基本成分是磷酸盐缓冲液,特别适用活细胞检测;
AF87:含无荧光浸油,为高倍观察特别设计的封片剂,对于DAPI染色特别有用(DAPI 在甘油基封片剂中有疏散的倾向)。
CFPVOH:聚乙烯醇水溶液
| 产品编号 |
描述 |
单位 |
| 19470 |
AF-1, 25ml |
瓶 |
| 19470-1 |
AF-1, 100ml |
瓶 |
| 19472 |
AF-2, 25ml |
瓶 |
| 19472-1 |
AF-2, 00ml |
瓶 |
| 19474 |
AF-3, 25ml |
瓶 |
| 19474-1 |
AF-3, 100ml |
瓶 |
| 19476-A |
Citifluor无荧光浸油, AFB7, 10ml |
瓶 |
| 19476 |
AF-4, 10ml |
瓶 |
| 19490 |
AF-100, 5ml |
瓶 |
| 19491 |
AF-200, 10ml |
瓶 |
| 19492 |
AF-300,10ml |
瓶 |
| 19493 |
CFM1, 10ml |
瓶 |
| 19494 |
CFM1, 10ml |
瓶 |
| 19495 |
CFM2, 10ml |
瓶 |
| 19496 |
CFM3, 10ml |
瓶 |
| 19497 |
UVM1, 10ml |
瓶 |
| 19498 |
UVM2, 10ml |
瓶 |
| 19499 |
UVM3, 10ml |
瓶 |
| 19469 |
Citifluor固体封片套件,30ml |
套 |

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文献和实验一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化,不同点如下: 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油:0.01M PBS (1:1)。条件许可,建议购买抗淬灭的封片液,使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多,需要分别设定阳性和阴性
。 7. 光漂白 减少照明强度/时间。 选用抗荧光淬灭封片剂。 二、背景太高了怎么办? 大家在操作时可以通过设置对照,帮助我们迅速判断背景的来源。对照包括自发荧光对照(无一抗、二抗)和无一抗对照。 1. 封闭不足 选用二抗种属来源的血清封闭。 选用链霉亲和素/生物素系统,需要用链霉亲和素封闭内源的生物链酶。 选用HRP系统,需要使用过氧化氢等商业化试剂盒去活化内源性HRP。 选用AP系统,需要使用左旋咪唑等商业化试剂去活化内源
免疫荧光(Immunofluorescence, IF)实验方法
体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是,标记好荧光的细胞片应尽早观察,或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。由于操作步骤比较多,同时在分析结果时无法像WB那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别,所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果,除了需要高质量的抗体,以及对实验条件进行反复优化外,还必须设立严谨的实验对照。总之,免疫荧光实验从细胞样品处理、固定、封闭、抗体孵育到最后的封片及观察拍照,每步都非常关键,需要严格控制实验流程中每个步骤的质量,才能最终达到
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