双交联琼脂糖凝胶4B FF

特别提示：包括双交联琼脂糖凝胶4B FF在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：双交联琼脂糖凝胶4B FF
英文名称：Sepharose 4B FF
产品货号：GH1035
产品规格：100ml/200ml

本制品是在4B琼脂糖微球的基础上经过两次交联形成的高交联凝胶层析基质，凝胶经过2次交联化学稳定性及物理性能显著增强，刚性增加，流速更快，使层析分离纯化时间大大缩短。可用于生物大分子的凝胶层析，也可作为基质用于亲和层析填料的制备。

琼脂糖凝胶(Sepharose)是目前生化专用分离介质中的主流产品，具有通透性高，可进行高流速操作，当工作液的离子强度以及PH值发生变化时，床体积没有明显变化；在高流速下有优良的分辨率。可以在pH3-13的苛刻的条件下工作，不需要反复地重新装柱，适用于工业规模生产，可以在位清洗等特点。琼脂糖凝胶主要用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶色谱纯化。蛋白、大分子复合物、超螺旋DNA、病毒、多糖的分离纯化。

保存条件：室温或4℃保存，避免冰冻。

除了双交联琼脂糖凝胶4B FF,，我公司还供应以下相关产品：



名称：DEAE-葡聚糖凝胶A-25
货号：QN3990
规格：25g|100g|500g

名称：聚酰胺(30～60目)
货号：QN3994
规格：500g

名称：葡聚糖凝胶G-15
货号：QN4042
规格：25g|100g|500g
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获得较高的流速。另外，粗级也可用于批量工艺。

葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的，在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶，因而应避免使用。

葡聚糖疑胶并不熔融，可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。

使用方法：
1．葡聚糖凝胶预处理：
  在室温下，将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀，凝胶体积不再变化。
  注：在溶胀前，加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降，沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多，需要重复多次漂洗将其除去，防止层析时阻塞凝胶柱，影响流速。
2．装柱：
  将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀，可在凝胶耐受的操作压下装柱，装好的凝胶柱可以检测柱效，检测过滤柱装填是否合格。
  凝胶层析分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度：分级分离时，一般需要100cm左右长的层析柱，柱高与直径之比为20:1-100:1，柱高过高时，凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压，应当尽可能避免；分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40-50cm以下，柱高与直径的比约为5:1-10:1。
3．平衡：
  上样前用平衡液平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）；
4．上样：
  分级分离时上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
  样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去，样品的粘度不能过高，否则影响分离效果。
5．洗脱方法:
  可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化；
6．在位清洗(CIP)
  凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。 方法是以40cm/h用1M氢氧*钠反向清洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7．保存
  凝胶柱暂时不用，可将其回收，一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干，可加入0.02%叠dàn化钠防腐或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生长。