- ￥510
- 伊塔生物
- 中国/进口
- YT0728
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
ITTABIO
- 保质期：
3年
- 英文名：
DEAESepharoseFastFlow琼脂糖凝胶FF
- 库存：
55
- 供应商：
北京伊塔生物科技有限公司
- CAS号：
108309
- 规格：
25ml
琼脂糖凝胶FF 琼脂糖凝胶FF 名称：琼脂糖凝胶FF 琼脂糖凝胶FF 货号：YT0728 英文名称：DEAESepharoseFastFlow琼脂糖凝胶FF 品牌：伊塔生物 CAS:微信1332规格：25ml
DEAE-琼脂糖凝胶FF是将基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质，具有优异的流动性能，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备.
2 贮存
产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20% 乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20% 乙醇）。
3 应用
本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等
特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子
的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
4 使用方法
4.1 装柱
1）将所有实验材料均需平衡至进行色谱层析操作的温度；
2）实验所需要用到的缓冲液以及洗脱液进行脱气处理；
3）DEAE-琼脂糖凝胶FF的储存液为20%乙醇，需要用去离子水彻底清洗掉保存液。
4）在柱子下端加入纯水装柱子，以排除气泡，将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒紧靠柱子
内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，用上样的平衡液平衡柱后
即可上样。
4.2 平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡液是低浓度的缓冲溶液，
如Tris 、PBS等。
4.3 上样
（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。
（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH值。盐浓度小，
介质对样品组分吸附较牢。用DEAE介质时，推荐的pH值是至少大于目标产品等电点1个单位。
4.4 洗脱
DEAE介质可用增大盐浓度或减小pH值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。
4.5 再生
一般用高盐浓度的缓冲液（含1~2mol/LNaCl）洗或减小pH洗10倍以上柱体积，接着用结合
蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
4.6 在位清洗
（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可以用2MNacl去除。
（2）对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用0.1MNaOH 去除。
（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，但要注
意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。
清洗完毕后，用至少10倍缓冲液平衡柱子
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文献和实验«Inhibitory effects of aan aqueous extract from Cortex Phellodendri on the growth and replication of broad-spectrum of viruses in vitro and in vivo»作者Jae-Hoon Kim 影响因子PMID: 27484768PMCID: PMC4970287DOI: 10.1186/s12906-016-1206-x Faecalicatena absiaana sp. nov., an obligately anaerobic bacterium from a pig farm faeces dump.作者Shin Y, Paek J, Kim H, Kook JK, Chang YH.Int J Syst Evol Microbiol. 2022 Feb;72(2). 影响因子doi: 10.1099/ijsem.0.005238.PMID: 35159617
的影响，所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍：使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80％的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II
[ 实验目的 ] 通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的方法和技术。 [ 实验原理 ] DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极移动。在一定的电场强度下， DAN 的迁移速度取决于分子筛效应，即 DNA 分子本身的大小和构型。具有不同的相对分子质量的 DNA 片段泳动速度不一样，可进行分离
把琼脂糖，即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂，溶于热水，冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。适于用 sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤，若使用 5％以下浓度的凝胶，也能够分级分离细胞颗粒、病毒等。利用其吸附性小的特点，有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。
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