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- 上海谷研
- GOY-0927B
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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
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- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
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- 供应商：
上海谷研
- 库存：
60
- 英文名：
Rat Lymph PrimaCell: Normal Lymphatic Fibroblasts
- 生长状态：
贴壁；悬浮
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
1.2ML/1.5ML
淋巴也叫淋巴液，是人和动物体内的无色透明液体，内含淋巴细胞，由组织液渗入淋巴管后形成。淋巴管是结构跟静脉相似的管子，分布在全身各部。淋巴在淋巴管内循环，最后流入静脉，是组织液流入血液的媒介。淋巴存在于人体的各个部位，对于人体的免疫系统有着至关重要的作用。其中，大鼠淋巴成纤维细胞分离自正常人淋巴节，成纤维细胞是胚胎中胚层起源的间叶细胞。纤维原细胞分泌富含I和，或III型胶原的细胞外基质。人淋巴成纤维细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的淋巴组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的淋巴组织能使得淋巴组织中成纤维细胞的一些功能特性发生改变，从而将成纤维细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养大鼠淋巴成纤维细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的成纤维原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的淋巴成纤维细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠淋巴成纤维细胞组织解离液 (3×1ml) （2）大鼠淋巴成纤维细胞组织处理缓冲液 (100ml) （3）大鼠淋巴成纤维细胞组织洗液(5 x ᰀ
实验操作：
1、 大鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒规格新生小鼠拉颈椎处死，乙醇消毒腿部，在超净工作台内，取肌肉于平皿，Hank’s洗3次，剔除脂肪、结缔组织，将肌肉标本剪约0.1cm3小块；
2、 将剪碎的肌肉移至离心管，Hank’s洗3次，静置1min，弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶，37度水浴消化20min，每5min摇动或吹打1次离心管，然后加入生长培养基终止消化；
4、 反复吹打后，依次100，200，400目过筛，滤液收集后，1000r/min离心10min；
5、 弃去清夜，用生长培养基重悬细胞，悬液加入未经PPL包被的培养瓶中，差速贴壁去除成纤维细胞，37度培养1h后，转移包被瓶中，生长培养基培养，4d换液，以后每天换液1次。
实验试剂：
1、大鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒规格培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S
4、染色液： 0.4% Trypan Blue
5、消化液： PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂：鼠抗人及大鼠desmin一抗，肌球蛋白（myosin）单克隆抗体
服务特点：
1. 大鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒规格细胞纯度高：原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上；
2. 细胞活力强：原代分离的细胞一般不能长久传代，提供P0-P3代的细胞，活力达80%以上，无污染；
3. 多种鉴定方式：可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
原代细胞分离：
一、大鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒规格细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏（可参阅后面有关章节）为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
硫酸奈替米星(标准品)Netilmicin56391-57-2
硫酸奈替米星Netilmicin56391-57-2
硫酸普拉睾酮钠（标准品）Dehydroepiandrosterone-3-sulfate质量规格：含量测定
硫酸铅(>99%,BC)Leadsulfate
硫酸羟基氯喹Hydroxychloroquine747-36-4
硫酸羟氯喹（标准品）Hydroxychloroquine747-36-4
硫酸氢氯吡格雷II型(标准品)Bisulfate
硫酸氢氯吡格雷II型Bisulfate
硫酸氢氯吡格雷I型Bisulfate
硫酸氢小檗碱（标准品）BERBERINESULFATE
硫酸庆大霉素(标准品)Gentamicin1405-41-0
硫酸庆大霉素Gentamicin1405-41-0
硫酸软骨素(标准品)Chondroitin9007-28-7
硫酸软骨素Chondroitin9007-28-7
硫酸铯(分子生物学级)Cesium10294-54-9
大鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒规格花生四烯酸15脂氧合酶1抗体 订购|咨询
环指蛋白45/自分泌运动因子受体抗体 订购|咨询
α1微球蛋白抗体 订购|咨询
乳腺癌增强蛋白2抗体 订购|咨询
α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体 订购|咨询
腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体 订购|咨询
膜粘连蛋白7抗体 订购|咨询
早老素γ分泌酶抗体 订购|咨询
钠钾ATP酶蛋白a1抗体 订购|咨询
Rho鸟苷酸交换因子2抗体 订购|咨询
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文献和实验【公告】丁香通试用中心：9月免费试用装精品来袭，申请试用赢取丁当（9.10有更新）
PES膜针头式滤器 M-MLV Reverse Transcriptase 反转录酶 美国PolyJet转染试剂免费试用 全自动核酸提取仪试用 过表达腺相关病毒 预灌装培养基平皿 9.5新增 小鼠胚胎成纤维细胞1million 美国Wealtec微型（掌上型）离心机 无需DNA抽提新型PCR扩增缓冲液 个人防护用品试用包（手套、口罩、灭菌袋） HIT-DH5α (全新一代感受态细胞，无需热刺激) 持续申请中 C反应蛋白单抗 葡聚糖凝胶分离纯化介质 SPF级实验
的酶、优化酶浓度和孵育时间，大部分组织都常用酶解法。 （3）组合法：即机械解离+酶解，使组织均匀充分地接触酶消化液，减少了强机械力和过长酶消化时间对细胞造成的伤害。有商品化的经过验证的解离试剂盒可以选择，搭配全自动组织解离仪，做到高效而稳定地组织解离。 5. 如何解离肿瘤组织？ 由于肿瘤组织异质性高细胞类型多（肿瘤细胞、成纤维细胞、免疫细胞、内皮细胞等）、细胞间连接紧密细胞外基质异常沉积、结构和微环境复杂、异常代谢等问题，肿瘤组织的解离较为困难。样本的选取需要合适，并且也要根据不同的肿瘤组织特
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