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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
详见说明书
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 库存：
22
- 英文名：
Mouse Bladder PrimaCell: Normal Bladder Smooth Muscle Cells
- 生长状态：
贴壁；悬浮
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
1.2ML/1.5ML
膀胱是一个储尿器官。在哺乳类，它是由平滑肌组成的一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出其中，小鼠膀胱平滑肌细胞分离自正常小鼠膀胱平滑肌组织。膀胱是由平滑肌细胞组成的中空器官。人膀胱平滑肌细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然膀胱平滑肌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的膀胱平滑肌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的平滑肌组织片能使得膀胱平滑肌组织中细胞的一些功能特性发生改变，从而将膀胱平滑肌细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养小鼠膀胱平滑肌细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的膀胱平滑肌原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的膀胱平滑肌细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠膀胱平滑肌细胞组织解离液(3×1ml) （2）小鼠膀胱平滑肌细胞组织处理缓冲液 (100ml) （3）FibrOutTM小鼠膀胱平滑肌细ᰀ
实验操作：
1、 小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书新生小鼠拉颈椎处死，乙醇消毒腿部，在超净工作台内，取肌肉于平皿，Hank’s洗3次，剔除脂肪、结缔组织，将肌肉标本剪约0.1cm3小块；
2、 将剪碎的肌肉移至离心管，Hank’s洗3次，静置1min，弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶，37度水浴消化20min，每5min摇动或吹打1次离心管，然后加入生长培养基终止消化；
4、 反复吹打后，依次100，200，400目过筛，滤液收集后，1000r/min离心10min；
5、 弃去清夜，用生长培养基重悬细胞，悬液加入未经PPL包被的培养瓶中，差速贴壁去除成纤维细胞，37度培养1h后，转移包被瓶中，生长培养基培养，4d换液，以后每天换液1次。
实验试剂：
1、小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S
4、染色液： 0.4% Trypan Blue
5、消化液： PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂：鼠抗人及大鼠desmin一抗，肌球蛋白（myosin）单克隆抗体
服务特点：
1. 小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书细胞纯度高：原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上；
2. 细胞活力强：原代分离的细胞一般不能长久传代，提供P0-P3代的细胞，活力达80%以上，无污染；
3. 多种鉴定方式：可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
原代细胞分离：
一、小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏（可参阅后面有关章节）为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
癸二酸(>96%，BR)Decanedioic111-20-6
癸二酸二丁酯(>98.0%(GC))Dibutyl109-43-3
癸二酸二甲酯(>97.0%(GC))Dimethyl106-79-6
癸二酸二辛酯（DOS）(Standardfor≥98.5%
癸二酸二乙酯(Standardfor≥99.5%
癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC))Di-n-octyl14491-66-8
癸氟奋乃静（标准品）Fluphenazine5002-47-1
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷Decyl58846-77-8
癸酸胆固醇酯Cholesterol1183-04-6
癸酸甲酯(Standardfor,≥99.5%(GC))
癸酸甲酯(分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC))Methyl110-42-9
癸酸钠Sodium1002-62-6
癸氧喹酯;乙癸氧喹酯Decoquinate质量规格：>99(T)
桂美酸（标准品）CINAMETIC35703-32-3
果胶(半乳糖醛酸(干基计)≥74.0%)9000-69-5
小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书输入蛋白4检测试剂盒 规格： 48T/96T
输入蛋白5检测试剂盒 规格： 48T/96T
输入蛋白7检测试剂盒 规格： 48T/96T
输入蛋白8检测试剂盒 规格： 48T/96T
输入蛋白9检测试剂盒 规格： 48T/96T
输出蛋白1检测试剂盒 规格： 48T/96T
输出蛋白3检测试剂盒 规格： 48T/96T
输出蛋白4检测试剂盒 规格： 48T/96T
输出蛋白5检测试剂盒 规格： 48T/96T
输出蛋白6检测试剂盒 规格： 48T/96T
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文献和实验℃下将收集的血浆分装保存，避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。常见的抗凝剂包括EDTA钠盐，肝素钠，枸橼酸钠等。检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书，查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。 细胞培养上清 将细胞培养上清液吸入离心管中，在2-8℃下以1000×g离心20分钟，除去细胞碎片和杂质，收集上清液备用，样本保存在-20℃或-80℃，避免反复冻融。 细胞提取液 反复冻融方法 1） 吸出培养板中的培养基，用胰蛋白酶消化细胞，然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮
细菌基因组 DNA提取试剂盒操作指南 （DP302）——细菌
以下操作按照天根产品 DP302 细菌基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。 实验准备： 1. 培养菌液1-5ml （本实验以革兰氏阴性菌为例，革兰氏阳性菌前处理详见说明书） 2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml 离心管 3. 无水乙醇 4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机 实验准备-试剂盒准备 使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请
死亡，并且运输难度大。对于这些考虑，组织保存液MACS组织保存液（130-100-008）可以使新鲜固体组织在2-8 ℃ 保存 48 小时并避免细胞激活和凋亡等背景效应。 2. Buffer配制对酶活的影响？ 在组织解离过程中，缓冲液（Buffer）的配制对酶活性有着至关重要的影响。配制不当的缓冲液会显著降低酶活，导致解离效率低下、细胞损伤增加或解离失败。 常见影响酶活性的关键因素：pH值，离子种类与强度，渗透压，温度，其他添加剂等。 按照说明书需要精心配制buffer，确保其维持最佳的pH、离子环境
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