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- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
33
- 英文名:
Rat Vascular PrimaCell: Normal Vascular Endothelial Cells
- 生长状态:
贴壁;悬浮
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
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- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
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- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
1.2ML/1.5ML
1. 细胞纯度高:原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上;
2. 细胞活力强:原代分离的细胞一般不能长久传代,提供P0-P3代的细胞,活力达80%以上,无污染;
3. 多种鉴定方式:可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
大鼠血管内皮细胞试剂盒费用【Rat Vascular PrimaCell: Normal Vascular Endothelial Cells】
血管是指血液流过的一系列管道。人体除角膜、毛发、指(趾)甲、牙质及上皮等处外,血管遍布全身。按血管的构造功能不同,分为动脉、静脉和毛细血管三种。其中,血管内皮细胞具有活跃的代谢功能,能够生成和灭活多种生物活性物质。大鼠血管内皮细胞可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然血管内皮组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的血管内皮组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的血管内皮组织能使得血管内皮组织中内皮细胞的一些功能特性发生改变,从而将血管内皮细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养大鼠血管内皮细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的血管内皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠血管内皮细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的血管内皮细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM大鼠血管内皮细胞组织解离液(3×1ml) (2)大鼠血管内皮细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM大鼠血管内皮细胞成纤维抑制剂1ᰀ
实验试剂:
1、大鼠血管内皮细胞试剂盒费用培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S
4、染色液: 0.4% Trypan Blue
5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂:鼠抗人及大鼠desmin一抗,肌球蛋白(myosin)单克隆抗体
实验操作:
1、 大鼠血管内皮细胞试剂盒费用新生小鼠拉颈椎处死,乙醇消毒腿部,在超净工作台内,取肌肉于平皿,Hank’s洗3次,剔除脂肪、结缔组织,将肌肉标本剪约0.1cm3小块;
2、 将剪碎的肌肉移至离心管,Hank’s洗3次,静置1min,弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶,37度水浴消化20min,每5min摇动或吹打1次离心管,然后加入生长培养基终止消化;
4、 反复吹打后,依次100,200,400目过筛,滤液收集后,1000r/min离心10min;
5、 弃去清夜,用生长培养基重悬细胞,悬液加入未经PPL包被的培养瓶中,差速贴壁去除成纤维细胞,37度培养1h后,转移包被瓶中,生长培养基培养,4d换液,以后每天换液1次。
拉坦前列腺素Latanoprost质量规格:含量>99.0%
拉坦前列腺素内半缩醛Latanoprost352276-28-9
拉西地平(标准品)Lacidipine质量规格:含量测定
拉西地平Lacidipine质量规格:>99%,BR
拉氧头孢钠Latamoxef64953-12-4
辣椒碱,辣椒素(合成)Capsaicin质量规格:>99%
辣椒碱,辣椒素(天然提取)Capsaicin质量规格:辣椒总碱>98%,辣椒单碱>55%
辣椒碱,辣椒素(天然提取标准品)Capsaicin质量规格:辣椒碱含量HPLC≥98%,标准品
辣椒平Capsazepine质量规格:>98%,美国进口
来氟米特(标准品)Leflunomide质量规格:HPLC>98%,标准品
来氟米特3-异构体Leflunomide61643-23-0
来氟米特Leflunomide质量规格:>98.5%,USP31,BR
来那度胺/雷利度胺(标准品)Lenalidomide质量规格:HPLC>98%,标准品
来那度胺/雷利度胺Lenalidomide质量规格:>99.0%,BR
来那替尼Neratinib(HKI-272)质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养
大鼠血管内皮细胞试剂盒费用肌动蛋白相关蛋白2/3抗体 订购|咨询
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型2抗体 订购|咨询
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型4抗体 订购|咨询
芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗体 订购|咨询
精神分裂症与犰狳重复基因抗体 订购|咨询
脱氢酶1型抗体 订购|咨询
磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体 订购|咨询
磷酸化活化转录因子1抗体 订购|咨询
磷酸化活化复制因子2抗体 订购|咨询
活化转录因子5抗体 订购|咨询
原代细胞分离:
一、大鼠血管内皮细胞试剂盒费用细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但药物的干扰可抑制凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
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文献和实验的[5],但细胞得率均较低,而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长,而且工作量大、过程繁琐且费用高[1],进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
红会影响细胞的活率和得率,尤其是一些敏感的细胞,比如说粒细胞,会因裂红造成敏感细胞的死亡,影响得率,同时产生的大量的红细胞的碎片也可能会影响下游实验,比如说磁分选/单细胞测序等。如果细胞悬液中红细胞的占比很高且严重影响下游实验,可以通过Ficoll密度梯度离心/去红细胞试剂盒Red Blood Cell Lysis Solution (10×)(130-094-183)去除红细胞。 为什么组织解离后检测不到目标细胞? 需要判断是解离后的组织悬液中没有目标细胞还是没能检测到目标细胞,可以考虑以下
,有可能会与某些实验设置之间存在冲突。在这种情况下,我们推荐使用不含 VEGF 的内皮细胞生长培养基。该培养基专门针对人类原代细胞进行优化,但也可用于牛、猪、小鼠、兔、象、狗和大鼠的大血管内皮细胞以及各种内皮细胞系。● 细胞分离试剂盒romoCell 细胞分离试剂盒的开发是为了用于温和和有效地分离培养中附着的人类原代细胞。每一产品批次均使用人类原代细胞进行检测。该试剂盒包括以下三种成分:1. HepesBSS (30 mM Hepes)2. 胰蛋白酶/EDTA溶液(0.04 % / 0.03
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