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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
266
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
- 规格:
100次(500μl)|500次(5×500μl)
特别提示:包括UltraStain DNA Marker在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:UltraStain DNA Marker
产品货号:WE0242
产品规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
本产品在常规Super DNA Ladder中添加了UltraStain染料,该染料是一种生物大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内。相对于EB的强诱变性,是一种安全无毒的核酸染料。使用本产品时,在制胶过程中无需加入EB等核酸染料,可直接将Marker上样,即可进行凝胶电泳。由于UltraStain与EB具有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置,在正常紫外光激发检测即可,使用非常方便和灵活。
自备试剂:琼脂糖;TAE/TBE电泳缓冲液(WE0216S/WE0215S);6×UltraStain Loading Buffer(WE0211S)
实验前准备及重要注意事项:
1、进行电泳时,由于凝胶中不需要额外添加核酸染料,其他待检测的DNA样品可使用本公司的6×UltraStain Loading Buffer进行制样和电泳。
2、由于该染料无需加入到凝胶中,可使制备的凝胶保存时间更长。
操作步骤:
1.配置合适浓度的不含核酸染料琼脂糖凝胶。
2.吸取5μl本产品直接电泳于上样孔内,进行常规电泳和图像采集。
将本产品分别电泳5μl /2.5μl,在不加染料的TAE缓冲液配置的琼脂糖凝胶中的电泳图。
储存条件:2~8℃避光
除了UltraStain DNA Marker,,我公司还供应以下相关产品:
名称:DNA marker(200-1500bp)
货号:BTN70503C
规格:50次
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:
注:800bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
名称:DNA Ladder(200bp-12kb)(12条带)(DNA分子量标准)
货号:YT425
规格:100次
本DNA Ladder是一种即用型DNA分子量标准,包含了12条双链DNA条带,可以满足各种常规DNA电泳分析的分子量参照需要。本DNA Ladder共含12条带,分别为200bp、500bp、800bp、1000bp、1500bp、2000bp、3000bp、4000bp、5000bp、6000bp、8000bp和12000bp 。
本DNA ladder中2000bp条带亮度较高,是其它条带亮度的3倍,使辨别条带更加容易。本DNA ladder中已添加了含有溴酚蓝的DNA上样缓冲液,可以直接使用。每孔上样5微升,即可观察到非常清楚的DNA条带。
储存条件:-20℃,有效期1年。
注意事项:
1. 如果使用强致癌的溴化乙锭(EB),须注意避免DNA ladder在使用时被溴化乙锭污染,操作时一定要采取适当的防护措施。推荐使用本公司无毒的核酸红色染料(YT015)或核酸绿色染料(YT016)。
2. 电泳时请尽量使用未用过的电泳缓冲液和新配制的琼脂糖凝胶,以免影响电泳效果。
名称:25×TAE预混粉末
货号:SY0262
规格:1pk
TAE即Tris acetate-EDTA buffer,是常用的DNA电泳缓冲液。
25×TAE Premixed Powder(预混粉末)可以配制40L 1×TAE工作液。使用时,可先用蒸馏水配制1L 25×TAE浓缩液。
产品组分
1×TAE工作液中含有40 mM Tris base,40 mM Acetate和1mM EDTA,pH8.2-8.4 (25 ℃)。
运输与保存方法
室温运输。18~25℃干燥储存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
名称:Tris-硼*电泳缓冲液(5×TBE,RNase free)
货号:GL1165
规格:500ml
用途:
电泳缓冲液,常用于RNA凝胶电泳
注意事项:
主要由Tris、硼*、EDTA、DEPC处理水组成。
储存条件:室温,12个月
名称:电泳级橙黄G溶液(1%)
货号:GL1171
规格:50ml
用途:
电泳上样液和生物染色
注意事项:
主要由1%甲基橙、去离子水组成。
储存条件:室温,避光,12个月
名称:溴化乙锭EB溶液(10mg/ml)
货号:GL1183
规格:5ml|10ml
用途:
高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙*酰胺凝胶中的DNA
注意事项:
主要由溴化乙锭/EB和去离子水组成。
储存条件:室温,避光,24个月
名称:溴化乙锭EB溶液(10mg/ml,RNase free)
货号:GL1185
规格:10ml
用途:
高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙*酰胺凝胶中的DNA
注意事项:
主要由溴化乙锭/EB和去离子水组成。
储存条件:室温,避光,24个月
名称:核酸变性预制胶(15%,10wells)
货号:QN2116
规格:10块
胶板尺寸:9.8×8.4×0.41cm
凝胶尺寸:8.1×7.4×0.15cm
浓度:15%
孔数:10 wells
上样量:60μl
电泳缓冲液:1X TBE buffer
电泳条件:150V,50-75min
保存条件:4℃,有效期2个月
应用:合成寡核苷酸分析和纯化、RNA酶保护实验、体外转录研究和RNA印迹
名称:DNA Ladder(100~2000bp)
货号:QN2129
规格:50T|100T
本DNA Ladder是由单独制备的PCR产物混合而成,共有6条DNA片段,已加入上样缓冲液,可以直接电泳,每次上样5μl。为便于电泳后观察,特异性加强750bp条带,其浓度约为100ng/5μl,其它条带的DNA浓度约为50ng/5μl。参考片段(bp):100、250、500、750、1000、2000
储存条件:-20℃
名称:SYBR Green I(10000×)
货号:QN2135
规格:50μl|100μl|1ml
采用琼脂糖电泳检测双链DNA时,SYBR GreenⅠ是zuì灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBR GreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBR GreenⅠ的zuì低检出限:20pg DNA(254nm);60pg DNA(300nm紫外透射);此外,SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1~2ng,300nm紫外透射),比EB灵敏20至100倍。SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。
使用说明:
点染法:用于琼脂糖凝胶电泳:取原液1μl加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml,再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1ml混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1~2μl工作液和5μl电泳样品混匀后静置5min后直接上样。
胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100ml,加热至融化,待温度将至50~70℃(感觉不烫手)加入该原液10μl。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。
注意事项:
1.SYBR GreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。
2.胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNA marker稀释5~10倍后使用。
3.在预染色方法中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
4.在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I可以全部从双链核酸上去掉。
5.在紫外照射透视下,与双链DNA接合的SYBR Green I呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄而不是绿色。
6.SYBR Green对玻璃和非聚丙*材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙*类容器。
储存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
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文献和实验1、Marker选择标准(1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。(2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2、常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带?A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳
DL5000 DNA Marker.doc
1.Marker选择标准 (1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。 (2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。 2.常见问题分析 Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker
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