DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收
产地：国产|进口
规格：50次
编号：BTN70503R
英文名：DNA ladder(100-2000bp)
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：750bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。

更多有关DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
ARB13040 小鼠补体片断5A(C5A)酶标法分析 Mouse complement fragment 5a,c5a ELISA KIT
BOC-D-高*丙*酸 Procyanidin 82732-07-8
F030820 BIOTIN标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*BIOTIN
PY01-010  干酪素  500克  
BL1423 SYBR Green Ⅱ(10000×)
9000-90-2 α-淀粉酶(高温淀粉酶)
CBZ-L-谷*酰胺 DEAE Sephadex A-25 2650-64-8
PBST(pH7.5)  1×|10× 500ml
F020108 山羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg
RN1801 RNAlong RNA长期保存液
透明质酸酶 EB 37326-33-3
ARB11884 人磷状癌细胞抗体elisa测定使用说明书 Human squamous cell carcinoma antibody  ELISA KIT
BL0872 羊抗猪IgG免疫血清 0.5ml
ARB11325 人胆碱乙酰化酶(CHAc)elisa检测操作说明书 Human choline acetylase,chac ELISA KIT
F010203 小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG(Fab)
辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(比色法)   50T
ARB10470 人白介素1(IL-1)含量分析 Human interleukin 1,IL-1 ELISA KIT
ARB13682 兔血管生成素2(ANG-2)检测服务 Rabbit angiopoietin 2,ang-2 ELISA KIT
F050322 绵羊IgG抗体 Sheep IgG
BTN131205 WGA糖蛋白分离试剂盒 Glycoprotein Isolation Kit(WGA)
DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收关键词：BTN70503R,DNA ladder(100-2000bp),DNA marker(100-2000bp)


·甲基化PCR试剂盒2.0
编号：BTN130428
英文名称：Methylation-Specific PCR Kit 2.0
规格：150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA 不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。


产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA 包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA 不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒提供的甲基化修饰试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)；本试剂盒提供的PCR试剂盒足够180次100μL体系的PCR反应。

试剂盒组成：
成分一：甲基化修饰试剂盒(BTN130301)

 

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注：包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。
成分二：即用型PCR 3.0(BTN90805)

成分	规格
PCR MagicMix 3.0	9ml
专用染料	360μl
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，保存期一年。但Proteinase K和即用型PCR Mix3.0 需要低温运输，-20℃保存。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL 包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS 悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS 洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL 包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL 选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL 新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA 将呈单链。
9．吸弃处理液A，用1mL新鲜配制的处理液B(配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR 靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA 不超过700ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的、2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750mL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。

四、甲基化专一性PCR(由于包埋块可能会抑制PCR，所以最好使用100μL体系的PCR进行甲基化检查，如果效果不好，建议使用巢式PCR)
27．在一干净的PCR 管中，加入下列成分(冰上操作)：

成份	样品管	对照管
PCR MagicMix 3.0	50μl	50μl
DNA包埋块(修饰后DNA)	1块(约含100ng DNA)	无
对照DNA(修饰前DNA)	无	100ng
自备MSP引物F	25 pmol	无
自备MSP引物R	25 pmol	无
自备非甲基化PCR引物F	无	25 pmol
自备非甲基化PCR引物R	无	25 pmol
补水到	100μl	100μl

28．将混合物混匀，放入PCR仪中进行热启动PCR，结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。


DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收关键词：BTN70503R,DNA ladder(100-2000bp),DNA marker(100-2000bp)

A3601-15 马血清 100ml|500ml
BTN70606 一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装 One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack
DN溶液(10%)   100ml
BL1153 50×Denhardt溶液
ARB11842 人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)Elisa分析 Human coagulation factor ⅩⅢ,fⅩⅢ ELISA KIT
盐*(代"酸")土霉素溶液(50mg/ml) Oxytetracycline 50mg/ml 10ml
F030302 胶体金标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*GOLD
ARB12906 小鼠白介素1β(IL-1β)酶标法分析 Mouse interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
BOC-D-天冬酰胺 Phenoxyacetic acid 75647-01-7
2-羰基丁酸*盐 Chitosan 2013-26-5
PY01-153  透明质酸酶(400u/mg)  1克  
SJ0865 CCK8
DN2001 酵母基因组DNA快速提取试剂盒(离心柱型)
PY08-071  李氏增菌肉汤1(LB1) 225ml  20瓶/箱，用于李斯特氏菌的选择性增菌培养
CTAB抽提液   500ml
液体生物防腐剂 Zearalenone

我公司正在优惠促销核酸电泳和回收等系列产品，期待您的咨询选购DNA marker(100-2000bp) 核酸电泳和回收。