- ¥280 - 1280
- Frdbio
- WBR0701
- 2025年09月22日
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
100ml/500ml/25ml
| 规格： | 100ml | 产品价格： | ¥488.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml | 产品价格： | ¥1280.0 |
| 规格： | 25ml | 产品价格： | ¥280.0 |
1.产品简介：
ECL化学发光液中的发光物（Luminol）在HRP的催化下发生化学反应而发光。在免疫印迹中，将蛋白质混合液经SDS-PAGE分离，转印至固相膜（NC或PVDF等）上，经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接（标记一抗）或间接（标记二抗）反应。学发光试剂中Luminol发生氧化降解，并发射波长为428nm的光，此光可经X光胶片(放射自显影片)感光记录下来。本产品在5分钟后光强达到最大，在30分钟时光强还能维持80%（以5分钟时光强为基础）。最终发光时长可达一小时。
2.包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 规格（25ml） | 规格(100ml) | 规格(250ml) |
| WBR0701-1 | ECL发光液A | 12.5ml | 50ml | 125ml |
| WBR0701-2 | ECL发光液B | 12.5ml | 50ml | 125ml |
| — | 说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
4.使用说明：
1.在二抗孵育完毕后将印迹膜充分洗涤，从冰箱取出ECL发光液到室温平衡。
2.根据需要量，将ECL发光液A和B按照1：1的比例等体积混合，配制为ECL工作液（例如：一张8cm×6cm的膜使用2ml工作液，为节省试剂，初次实验可用洗涤缓冲液测试，以最少的液体盖住整个膜的表面）。
3.弃去洗涤缓冲液，转移到暗室或者避光盒里操作，将ECL工作液滴加在印迹膜上，确保工作液覆盖整张膜，室温孵育5分钟。
4.去掉多余发光底物工作液，将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间，此过程应小心完成，避免膜与膜之间产生气泡。
5.在暗室内进行X-光胶片曝光，或将膜放置到荧光、化学发光成像仪内，按照仪器说明书进行检测。
6.因本产品发光发光超度高，发光时间长，所以为得到理想的结果，可多次曝光（不同时长）以得到理想的结果。
5.注意事项：
1.为获得最佳实验结果，发光液请现用现配。
2.建议在封闭缓冲液及所有抗体稀释液中加入高质量的吐温-20（终浓度为0.05%），以减少非特异性结合。
3.由于叠氮钠是HRP抑制剂，在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂。
4.免疫印迹实验进行全过程中，请确保印迹膜始终处于湿润状态，避免干燥。
5.在与膜发生接触过程中请佩戴手套或者使用洁净镊子，避免蛋白污染。
6.实验过程中，请使用洁净器材。保证非金属设备没有明显划痕，金属设备表面无锈,锈可能导致膜上带有污点或者高背景。
*本试剂仅供实验室研究使用
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文献和实验Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。 1．HRP-ECL 发光法： 将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于 A、B 混合液滴上，熄灯至可见淡绿色荧光条带（5 min 左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中 1～2 min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定
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