- ¥998 - 3650
- 康朗生物
- CAT#: KL10503
- 中国/上海
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
100μl/支
INVSc1
INVSc1 Chemically Competent Cell 产品说明书产品规格 （CAT#: KL10503）
INVSc1 Competent Cell: 100μl/支 保存： -80℃（3个月）
pYES2 (control vector, 10 ng/μl) 10μl 保存：-80℃（12个月）
Carrier DNA (10 μg/μl) 100μl 保存：-20℃（12个月）
PEG/LiAC: 5ml 保存： 4℃（12个月）
基因型
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
产品说明
INVSc1菌株是专门用来做重组蛋白表达的宿主酵母，pYES2质粒与INVSc1酵母配套使用，激活pYES2质粒的GAL1启动子的转录进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1为合子型，可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA板进行筛选。INVSc1感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，pYES2质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
操作方法
1. 取100 µl冰上融化的INVSc1感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，Carrier DNA (95-100℃，5 min，快速冰浴，重复一次) 10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀，30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
2. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
3. 5000 rpm离心 40 s弃上清，ddH2O 400 µl 重悬，离心 30s弃上清。
4. ddH2O 50 µl重悬，涂质粒筛选用：SD-U medium板，29℃培养48-96 h。
注意事项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. INVSc1酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
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文献和实验Preparing chemically competent cells
Materials Plate of cells to be made competent TSS buffer LB media Ice Glassware & Equipment Falcon tubes 500μl Eppendorf tubes, on ice 200ml conical flask 200μl pipetman or repeating
Transforming chemically competent cells
Method Thaw TSS cells on ice. Add DNA, pipette gently to mix (1μl of prepped plasmid is more than enough). Note: If you are adding small volumes (~1μl), be careful to mix the culture well. Diluting the plasmid
TOP10 chemically competent cells
Detergent is a major inhibitor of competent cell growth and transformation. Glass and plastic must be detergent free for these protocols. The easiest way to do this is to avoid washing glassware, and simply rinse it out. Autoclaving glassware filled
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
