- ¥998 - 3650
- 康朗生物
- CAT#: KL2020
- 中国/上海
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
JM330 Chemically Competent Cell
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
100μl/支
JM330
JM330 Chemically Competent Cell 产品说明书产品规格（CAT#: KL2020）
JM330： 100μl/支
pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl
保存条件(保质期)： -80℃（6个月）
基因型
F- φ80 lacZ∆M15 ∆(lacZYA-argF)U169 recA1 endA1 hsdR17(rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1 tonA
产品说明
JM330菌株(即DH5α T1 Phage Resistant)，来源于DH5α菌株。在DH5α大肠杆菌基因组中引入tonA，赋予其抗噬菌体T1,T5的能力，即为JM330。JM330菌株最大的特点是其可以在体内特异性降解甲基化质粒模板，广泛应用于各种DNA定点突变试验中。JM330菌株缺失核酸内切酶 (endA1)和重组酶(recA1)，提高了质粒DNA的产量和质量； lacZΔM15的存在使JM330可用于蓝、白斑筛选。开发的JM330感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>1×109 cfu/μg DNA。
操作方法
1. JM330感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（例如：Dpn I消化产物等）并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏70分钟。
4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体，留取50 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱至少15小时。
注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. JM330可以对未被Dpn I降 解掉的质粒模板进行进一步的降解，因此可以保证定点突变具有更高的阳性率。
3. 转化高浓度的质粒或Dpn I消化产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP330 石蜡包埋组织 DNA 快速提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技（北京）有限
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