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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
51
- 英文名:
MouseBoneJoint:NormalSynovialCell
- 生长状态:
贴壁;悬浮
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
1.2ML/1.5ML
产品描述:小鼠滑膜细胞分离自正常小鼠滑膜组织,滑膜细胞主要功能:(1)滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关。(2)滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏。(3)是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。公司提供的小鼠滑膜细胞,均来自新鲜组织。细胞的培养采用公司专利产品小鼠滑膜细胞培养试剂盒(MouseBoneJointPrimaCell™:NormalSynovialCellCatNo.3-4015)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,小鼠滑膜细胞可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
实验操作:
1、 小鼠滑膜细胞品牌新生小鼠拉颈椎处死,乙醇消毒腿部,在超净工作台内,取肌肉于平皿,Hank’s洗3次,剔除脂肪、结缔组织,将肌肉标本剪约0.1cm3小块;
2、 将剪碎的肌肉移至离心管,Hank’s洗3次,静置1min,弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶,37度水浴消化20min,每5min摇动或吹打1次离心管,然后加入生长培养基终止消化;
4、 反复吹打后,依次100,200,400目过筛,滤液收集后,1000r/min离心10min;
5、 弃去清夜,用生长培养基重悬细胞,悬液加入未经PPL包被的培养瓶中,差速贴壁去除成纤维细胞,37度培养1h后,转移包被瓶中,生长培养基培养,4d换液,以后每天换液1次。
实验试剂:
1、小鼠滑膜细胞品牌培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S
4、染色液: 0.4% Trypan Blue
5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂:鼠抗人及大鼠desmin一抗,肌球蛋白(myosin)单克隆抗体
服务特点:
1. 小鼠滑膜细胞品牌细胞纯度高:原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上;
2. 细胞活力强:原代分离的细胞一般不能长久传代,提供P0-P3代的细胞,活力达80%以上,无污染;
3. 多种鉴定方式:可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
原代细胞分离:
一、小鼠滑膜细胞品牌细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但药物的干扰可抑制凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
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小鼠滑膜细胞品牌Metaxin 1蛋白检测试剂盒 规格: 48T/96T
Metaxin 2蛋白检测试剂盒 规格: 48T/96T
Metaxin 3蛋白检测试剂盒 规格: 48T/96T
Mg2+/Mn2+依赖性蛋酸酶1A检测试剂盒 规格: 48T/96T
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Midasin蛋白检测试剂盒 规格: 48T/96T
Midline 1蛋白检测试剂盒 规格: 48T/96T
Midline 2蛋白检测试剂盒 规格: 48T/96T
Misato同源物1检测试剂盒 规格: 48T/96T
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文献和实验【原创】实验方法分享:用某品牌rProtein A填料有效纯化小鼠腹水单抗
(PBS+1M NaCL,pH7.5-8) 的缓冲液置换0.3ml该品牌rProteinA填料的storage buffer。 2,用binding buffer等体积稀释小鼠腹水1ml(15ml离心管),10000RPM离心15分钟 3,取离心上清,把步骤1中的填料加入,室温在摇床上晃匀5-60分钟(时间越长,温度37度,能提高抗体和填料的结合率,此次实验中就晃了5分钟,导致流穿中还有一点点抗体残留;) 4,3-5000RPM离心1-3分钟,沉降填料,吸去上清(流穿) 5,加入10
在相同的模板、引物和反应体系下,用ABI7000荧光定量PCR仪也进行了其荧光定量产品和国际知名厂家A品牌,以及T品牌相关产品的对比实验。 实验材料 小鼠肝脏组织 实验方法 RNA提取:BioTeke RNApure高纯总RNA提取试剂盒,操作步骤请参考说明书。 目的基因:小鼠管家基因β–actin cDNA制备:测定小鼠肝脏总RNA浓度后,使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。 二步法荧光定量PCR: 小鼠
随着生命科学的发展,围绕蛋白进行的研究越来越多,抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。面临着纷呈复杂的抗体试剂市场,如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。 当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候,如何选择适合我们实验需要的抗体,并恰当保存使用,是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多,品牌众 多,技术参数不一,价格和质量更是相差甚大,如何购买到高质量价格合适的抗体,并准确地做出我们想要的结果,其中有很多细节需要注意。 一、抗体选择总体原则1. 关于特异性的选择
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